焦芳婵， 童治军， 方敦煌， 肖炳光， 袁欣婕， 陈学军， 李永平

(1.云南省烟草农业科学研究院， 昆明 650021；2.江西省农业科学院蔬菜花卉研究所， 南昌 330200)

普通烟草花叶病(Tobacco mosaic virus，TMV)是云南等烟叶主产区分布广、为害重的主要病害之一[1]，TMV广泛存在于活体寄主、植物残体、大田土壤，即使在低温和高温条件仍能保持一定的病毒侵染活力[2]，而且其寄主范围非常广，能侵染茄科(烟草、番茄、茄子)、葫芦科(西瓜)、十字花科(油麦菜)等[3]。

选育抗TMV的品种，是应对TMV为害最为经济和有效的手段。野生烟草-心叶烟中含有显性单基因TMV免疫基因N，前人已将N基因转育到了栽培烟草，N基因也是人类首次克隆的植物抗病基因[4]。我国利用该抗源已选育10多个高抗TMV的烟草品种[5-9]，但由于连锁累赘的存在，迄今仍没有适宜的高抗TMV的烤烟品种进行大规模推广种植[10]。除了利用烟草基因组序列数据设计引物，从大批量的杂交后代筛选短的抗TMV片段外[11]，从野生烟草资源中，转育新的TMV抗源也是应对措施之一。Yuan等[12]报道，在圆锥烟草(N.paniculataPI 555550)等烟属野生种中，其高抗TMV的特性由N基因家族其他成员提供。但迄今尚未见N基因同源基因片段(简称N同源片段，下同)转入栽培烟草的报道。本试验利用烤烟品种红花大金元与圆锥烟草(N.paniculata)开展种间远缘杂交研究，以期将新的TMV抗性基因导入栽培烟草，创制新的抗病种质资源，为选育抗TMV的烟草品种提供材料与数据支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料

所用材料为烤烟主栽品种红花大金元(简称HD，染色体……