PM2.5暴露后激活核转录因子/环氧化酶2/前列腺素E2信号通路引起氧化应激损伤雄性生殖功能的机制研究
2021-09-22刘津念殷永健张正红
刘津念,郑 剑,殷永健,张正红,盛 夏,唐 伟
(1.重庆市巴南区第二人民医院泌尿外科,重庆 400054;2.重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆 400016)
不育是威胁人类生殖健康的全球性难题[1,2]。以大气颗粒物(PM)为特征的大气复合污染物暴露对健康有直接或间接影响,尤其是对生殖系统的影响也开始受到人们关注[3]。研究表明[4],大气细颗粒物(PM2.5)对男性生殖系统有严重深远影响。前列腺素E2(PGE2)为花生四烯酸经环加氧酶催化的代谢产物,是重要炎症因子,COX-2为PGE2生成的主要限速酶,核转录因子κB(NF-κB)信号通路则是体内一条非常经典信号通路,在细胞凋亡过程中发挥重要作用[5,6],研究发现[7],NF-κB/COX-2/PGE2与男性生殖功能受损有关。本研究探讨PM2.5暴露后激活NF-κB/COX-2/PGE2信号通路引起氧化应激损伤雄性生殖功能的机制,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料2019年11月至2020年11月于重庆医科大学实验动物中心、重庆医科大学生命科学院开展实验。选取20只清洁级别c57bl雄性小鼠,体重34~37 g[(35.48±1.27)g]。均于单笼饲养在18~21 ℃、湿度45%~60%环境中,实验期间饲喂普通清洁级饲料,自由摄食饮水,在适应性饲养1周后开展实验。主要试剂:DMEM/F12培养基(Hyclone公司);胎牛血清(北京民海生物科技有限公司);1∶250胰蛋白酶(北京聚合美公司);胶原酶Ⅰ(Sigma公司);考马斯亮蓝G250(Solarbio公司);ELISA快速检测试剂盒(Meimian公司);AxyPrep总RNA小量提取试剂盒(Axygen公司);RNase-free Water(北京TransGen Biotech公司);兔抗NF-κB多克隆抗体(英国Abcam公司);兔抗COX-2单克隆抗体(美国Cell Signaling Technology公司);兔抗PGE2单克隆抗体(英国Abcam公司);兔抗β-actin多克隆抗体(美国Proteintech公司)。仪器:小动物手术器械及溶液配制容器、电子天平、超净工作台、CO2培养箱、恒温水浴、离心机,均购自美国Thermo公司;……
