郑学芝 郭冉 李佳 王文婷 张绪东 徐秋玲

摘 要：目的：观察夏枯草提取物对人食管癌Eca-109细胞Survivin和Caspase-3基因表达影响，研究夏枯草抗食管癌作用及其机制。方法：IC50浓度夏枯草提取物作用于食管癌Eca-109细胞，CCK-8法检测细胞增殖抑制率，RT-PCR、Western Blotting法检测Survivin和Caspase-3基因及蛋白表达，Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果：食管癌Eca-109细胞出现增殖抑制， Survivin表达减少，Caspase-3表达增加，细胞凋亡率增高。结论：夏枯草可抑制食管癌Eca-109细胞增殖，抑制Survivin表达，促进Caspase-3表达，促进细胞凋亡。

关键词：夏枯草;食管癌;凋亡;Survivin;Caspase-3

夏枯草具有消炎、抗菌、降血糖、抗病毒、抗肿瘤等药理学作用[1]。本实验研究夏枯草对食管癌Eca-109细胞Survivin和Caspase-3基因表达的影响，探讨夏枯抗食管癌作用及机制，为临床应用夏枯草治疗食管癌提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料

食管癌Eca-109细胞系，牡丹江医学院科研中心提供;夏枯草，购自Sigma-Aldrich中国公司;RPMI1640培养基、胰蛋白酶、原装胎牛血清，Gibco公司;顺铂，齐鲁制药厂;RT-PCR试剂盒、Cell Counting Kit-8、GAPDH小鼠单抗，碧云天生物技术研究所;Annexin-V-FITC/PI凋亡双染试剂盒，BD公司;兔抗人Survivin抗体、鼠抗人Caspase-3抗体，武汉博士德生物工程公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞准备工作 食管癌Eca-109细胞培养于RPMI 1640培养基中（含10%胎牛血清），置37℃，饱和湿度为5%CO2的培养箱内培养，2～3 d传代1次，选取处于对数生长期细胞用于实验。

1.2.2 实验分组情况 共分3组：夏枯草作用组（浓度为IC50，Pr组）、阳性对照组（加顺铂5 μg/mL，Po组）、空白对照组（加培养液，Bl组）。

1.2.3 观察细胞形态变化 各组细胞常规孵育培养24、48、72 h后，置于倒置显微镜下观察各组细胞形态变化情况。

1.2.4 CCK-8法测定各组细胞增殖抑制率 在96孔……