巫秀红，刘庆斌，张永红，郭俊林，张 玮*，崔德凤*

(1.北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室，北京 102206； 2.北京市动物疫病预防控制中心，北京 102609)

布鲁氏菌病，简称布病或马耳他热，是中国的二类动物疫病之一，是由布鲁氏菌(Brucella)引起的人兽共患病，世界动物卫生组织将其列为B类动物疫病。布鲁氏菌主要分为6个种属：羊种布鲁氏菌、牛流产布鲁氏菌、猪种布鲁氏菌、犬种布鲁氏菌、绵羊附睾布鲁氏菌和沙林鼠布鲁氏菌[1-2]，其中以羊种布鲁氏菌病最为常见。临床主要特征是波状热、不育不孕、慢性感染、公畜睾丸炎和母畜流产等[3]。近年来，中国多地报道布鲁氏菌病呈反弹趋势，根据《国家布鲁氏菌中长期规划(2016—2020年)》要求，本研究致力于建立一种灵敏、特异、准确的布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法，为布鲁氏菌病临床诊断和流行病学调查提供技术支持。

1 材料与方法

该试验已通过北京市动物疫病预防控制中心福利与伦理审查，编号为ACDC2019052001。所有操作均在北京市动物疫病预防控制中心二级生物安全实验室进行。

1.1 材 料

1.1.1 试验菌株 牛种布鲁氏菌2308株核酸、羊种布鲁氏菌16M株核酸、猪种布鲁氏菌S2株核酸、犬种布鲁氏菌6166株核酸、致病性大肠杆菌、志贺氏菌、金葡萄球菌、猪链球菌由北京市动物疫病预防控制中心实验室留存；莫氏耶尔森菌16197、猪霍乱沙门氏菌186354购买于北京北纳创联生物技术研究院；肠炎沙门氏菌3949、鼠伤寒沙门氏菌14028、单增李斯特菌1599、奇异变形菌1969购买于中国兽医药品监察所。……