白细胞介素-6量子点荧光免疫层析法的建立及性能验证*
2021-09-16唐劲松林景涛周正维任燕飞张二盈
唐劲松,林景涛,周正维,任燕飞,张二盈
1.广东省东莞市大朗医院检验科,广东东莞 523700;2.深圳市金准生物工程有限公司,广东深圳 510103
白细胞介素(IL)-6作为一种炎症因子,当机体发生感染时迅速升高,可在2 h达高峰,其升高水平与感染的严重程度一致,并诱导降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)分别在感染2 h和6 h后开始升高,而且IL-6与患者预后密切相关[1]。IL-6即时检验(POCT) 已经开始用于临床,且应用潜力较大。目前,有多种IL-6的检测方法[2],较为常用的是化学发光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法及免疫层析法,不同的检测方法各有优劣。量子点荧光材料是一种新型标记材料,已经开始应用于临床,与普通荧光材料相比,量子点荧光材料具有荧光强度高、光稳定性好、荧光寿命长、激发谱宽、发射谱窄、宽大的斯托克斯位移和生物相容性好等优点[3]。本研究通过量子点荧光材料标记抗体,研发出量子点免疫荧光层析法IL-6检测试剂盒,从灵敏度、回收率、精密度、特异度等方面进行性能验证,并与贝克曼化学发光法IL-6检测试剂盒进行对比。
1 材料与方法
1.1仪器与试剂 量子点荧光免疫分析仪KF-Q001-A由深圳市金准生物工程有限公司生产,其他主要仪器包括YXQ-LS-50A型立式压力蒸汽灭菌器(杭州科晓化工仪器设备有限公司)、SW-CJ-2FD型超净工作台(上海巴玖实业有限公司)、三维划膜喷金仪(上海金标生物有限公司)、DXI800化学发光仪(美国贝克曼公司)。量子点CdSe/ZnS、巯基丁二酸(MES)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、1-乙基-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺 (EDC)、巯基甘醇单甲醚、小牛血清购于Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司;……
