miR-133过表达对结肠癌细胞SW480凋亡、增殖和裸鼠成瘤的影响
2021-09-16潘琼谷见法刘松格杨晓瑞易善永
潘琼,谷见法,刘松格,杨晓瑞,易善永
(郑州市中心医院肿瘤内科,郑州 450000)
结肠癌是一种常见的胃肠道肿瘤,在世界范围内的发病率和与癌症相关的死亡率中位居前例[1]。相关研究表明,癌基因的激活和抑癌基因的失活对结肠癌的发生、发展起重要作用[2]。尽管在诊断和治疗上有很大进步,但其发病机制尚未完全明了。因此,需要进一步探寻结肠癌的关键分子机制,为结肠癌患者开发更有效的疗法。MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为19~24 nt的内源性非编码小RNA,通过靶向靶基因3′-UTR的碱基互补配对结合,引起转录抑制或调节mRNA降解,从而在植物和动物中发挥重要作用[3]。miRNA控制并参与多种细胞过程的基因表达,包括炎症、代谢、增殖和细胞凋亡[4]。已有研究表明miR-133在肺癌、胃癌、膀胱癌和前列腺癌中表达下调,miR-133过表达抑制癌细胞的恶性行为,提示其可能是阻断癌症进展的靶点[5-8]。但目前miR-133在结肠癌进程中的作用和潜在机制尚不完全清楚,相关研究很少,本文旨在探究miR-133过表达对结肠癌细胞SW480凋亡、增殖和裸鼠成瘤的影响。
1 材料和方法
1.1 主要试剂RPMI1640培养基(61870-127)、胎牛血清(26400-036)、青-链霉素(15140-122)和胰蛋白酶(25200-056)均购自美国Gibco公司;辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(A0208)、BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0012S)、Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(C1062S)、CCK-8试剂盒(C0037)购自上海碧云天生物技术研究所;兔抗Bax(ab53154)、Bcl-2(ab196495)、Caspase-3(ab13847)、cleaved Caspase-3(ab2302)、Caspase-9(ab52298)、cleaved Caspase-9(ab2324)、c-Myc(ab39688)、GAPDH(ab9485)单克隆抗体均购自英国Abcam公司。
1.2 细胞培养 人结肠癌SW480细胞株来源于中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection,CCTCC),置于37℃,5%CO2恒温培养箱中用RPMI 1640培养基(含10%胎牛血清和1%青-链霉素)培养,每3 d传代1次,收集细胞时用0.25%胰蛋白酶消化,实验选用对数生长期细胞。……
