陈鸿运，李晓明，黄国胜，杨金华，乔飞

（南阳医学高等专科学校第一附属医院普胸外科，南阳 473000）

近年来环境恶化、吸烟人数急剧上升导致肺癌患者逐年增加，目前非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLS）已经成为我国最常见的肺癌之一[1]。肺癌的治疗方式主要包括手术治疗和药物化疗[2]。随着科技的发展，使用长链非编码RNA（long noncodingRNA，lnc RNA）基因治疗成为目前研究的热点，目前lncRNA在众多疾病中均发挥着重要的作用[3]。XIA等[4]研究表明，lncRNAPTCSC3可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路，抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭。WANG等[5]研究表明，lncRNAPTCSC3可以抑制乳腺癌细胞增殖。因此笔者推测lncRNAPTCSC3对肺癌A549细胞也有一定的抑制效果，但目前关于lncRNAPTCSC3对肺癌细胞的抑制研究较少，作用机制也尚不确定。因此本文旨在探究lncRNAPTCSC3对A549细胞的影响及其机制。

1 材料与方法

1.1 材料A549细胞由中国科学院细胞库提供；Lipofectamine 2000购自Invitrogen公司；caspase-3抗体（货号：ab32351）、caspase-9抗体（货号：ab32539）、Ki67抗体（货号：ab92742）、p21抗体（货号：ab109520）、E-cadherin抗体（货号：ab1416）、N-cadherin抗体（货号：ab76011）购自艾博抗有限公司；凋亡检测试剂盒（货号：P-CA-201）购自武汉普罗塞生命科技有限公司；流式细胞仪购自BD公司；Transwell小室购自美国Corning Coseter公司；流式细胞仪（型号：CyoFLE）购自贝克曼有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及传代 快速取出A549细胞解冻，以1 000 r/min离心5 min，将培养箱温度设置为37℃，CO2浓度调节为5%，将细胞放入FBS、青霉素和链霉素混合的RPMI1640培养基中，待细胞融合到90%左右时，加入1 mL的胰蛋白酶消化传代培养，进行后续实验。

1.2.2 pcDNA-lncRNAPTCSC3重组质粒构建 根据引物设计软件设计lncRNAPTCSC3引物，使用PCR扩增产物，待pcDNA3.1-lncRNAPTCSC3的载体建立成功后，使用内切酶对PTCSC3基因进行双酶切处理，切后的……