张维冰, 卢 睿, 张凌怡

(华东理工大学化学与分子工程学院, 上海市功能性材料化学重点实验室, 上海 200237)

外泌体(exosomes)是一种几乎所有细胞都分泌的细胞外囊泡,尺寸为30～150 nm,具有磷脂双层膜结构,其表面富含多种蛋白质,其内容物包括蛋白质、核酸、脂质和代谢物[1,2]。外泌体是来源细胞、邻近细胞以及远处组织的通讯介体,是癌症信息的宝贵载体[3-8],其在体液中广泛存在,含量丰富且易于获取[9],故收集由肿瘤细胞释放的外泌体已成为肿瘤液体活检的主要方向之一[10]。为保证液体活检结果的可重复性和一致性,需发展从复杂样品中富集具有足够产量和纯度的外泌体方法。目前基于外泌体的尺寸、疏水性蛋白和特征蛋白发展了对应的外泌体分离纯化方法,如超速离心法、聚合物沉淀法和免疫亲和法等[11-14]。其中,超速离心法是外泌体研究领域公认的“金方法”,该法需进行多次高速离心,且需要昂贵的超速离心机,所得外泌体产量低、纯度高[15]。

适配体(aptamers, Apt)是一段总长为20～100 nt的寡核苷酸链,表现出配体结合特性,可用于在nmol水平上检测不同类型的药物和生物分子,被称为化学抗体[16-19]。适配体的识别特性来自于特定序列(基因型)和折叠成具有特定功能(表型)的不同形状[20]。除了适配体特定的结构组成,氢键、范德华力、π共轭效应和静电相互作用等非共价相互作用也稳定了靶分子-适配体复合物[21]。相较于抗体,适配体成本低,易于合成及化学修饰,可重复使用[22,23]。外泌体表面的特征蛋白如跨膜蛋白CD63、CD9、CD81常被作为外泌体的标记[24],其中CD63是被使用最多的外泌体标记[25]。……