陈潇菲 迟成 孔德玉 葛鑫

【摘要】：目的：探讨MTHFR、MTRR基因多态性与妊娠期不良结局的关系。方法：研究时间2018年3月-2020年10月，德州市妇幼保健院就诊的围产期产妇410例为研究对象，按照是否有无不良孕产史分成两组;中有不良妊娠结局的孕妇125例为观察组，无不良妊娠结局孕妇285例为对照组;两组研究对象进行基因检测，比较两组MTHFR  C677T 、MTHFR  A1298C、MTRR  A66G位点基因分型，对造成妊娠期不良结局进行多因素分析。结果：两组MTHFR C677T 位点基因比较，c66c，C677T 基因型比较差异有统计学，P<0.05。T677T基因型比较无统计学意义，P>0.05。两组MTRR A66G位点基因分型比较，A66A，A66G基因型比较有统计学意义，P<0.05。G66G基因型比较无统计学意义，P>0.05。两组MTHFR A1298C位点基因分型比较无统计学意义，P>0.05。结论：MTHFR  C677T、 MTRR A66G位点的基因多态性分布与不良妊娠的发生有相关性，MTHFR  C677TT、MTRR  66 AG 基因型是不良妊娠发生的独立危险因素。

【关键词】：甲硫氨酸合成酶还原酶;5，10- 亚甲基四氢叶酸还原酶;基因多态性;妊娠期不良结局

山东省省医药卫生发展计划：2017WS678

不良妊娠结局（adverse pregnancy outcomes APOs）是指妊娠后无法产生功能、外观的子代，如自然流产，异位妊娠等。不良妊娠结局不仅对孕妇造成伤害，对家庭、社会也有一定的影响。我国是人口大国，不良妊娠结局对人口健康素质有一定的影响。叶酸（FA）是一种人体必需的水溶性 B 族维生素，其主要参与氨基酸、核酸等代谢外，同时对 DNA 、RNA的合成、细胞的增殖等也具有重要的作用。近年来，5， 10- 亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）、甲硫氨酸合成酶还原酶（MTRR）基因多态性与不良妊娠结局关联性的研究成为热点。本文主要探讨MTHFR、MTRR基因多态性与妊娠期不良结局的关系，研究时间2018年3月-2020年10月，在我院就诊的围产期产妇410例为研究对象，现整理如下：

1资料与方法

1.1一般信息

研究时间2018年3月-2020年10月，德州市妇幼保健院就诊的围产期产妇410例为研究对象，按照是否有无不良孕产史分成两组，其中有不良妊娠结局的孕妇125例，为观察组，年龄22-36岁，平均（29.89±2.35）岁。无不良妊娠结局孕妇285例为对照组，年龄22-37岁，平均（29.81±2.31）岁。两组基本信息比较，无统计学意义，P>0.05。本次研究，经研究对象及家属知情且同意;经医院伦理委员会批准。

1.2方法

采集所有研究对象外周血，利用柱式抽提试剂盒抽取样本 DNA。 MTHFR、MTRR基因多态性采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR -RFLP）技术。设置反应条件：95℃预变性3min→92℃预变性15s→60℃退化1min→75℃预变性45s;上述循环操作30个，然后进行扩增，75℃延伸10min。最后通过相应的扩增产物进行片段分析，详细记录结果。

利用分析软件确定各个样品的基因分型结果，对MTHFR C677T 、MTHFR  A1298C、MTRR  A66G位点基因分型比较。

1.3统计学处理

本次研究计量资料、计数资料分别以 （±s），和百分比表示，采用 t 检验和X2检验;应用软件SPSS23.0，统计结果P<0.05，有统计学意义。

2结果

2.1两组MTHFR  C677T 位点基因分型比较

兩组MTHFR C677T 位点基因比较，c66c，C677T 基因型比较差异有统计学，P<0.05。T677T基因型比较无统计学意义，P>0.05。

2.2两组MTHFR A1298C位点基因分型比较

两组MTHFR A1298C位点基因分型比较无统计学意义，P>0.05。

2.3两组MTRR A66G位点基因分型比较

两组MTRR A66G位点基因分型比较，A66A，A66G基因型比较有统计学意义，P<0.05。G66G基因型比较无统计学意义，P>0.05。

2.4不良妊娠多因素分析

MTRR66AA、MTHFRC677TT是孕妇不良妊娠结局发生的独立危险因素，P<0.05。

3讨论

叶酸是备孕期，孕初期重要的一种维生素，而叶酸的代谢中MTHFR 是其关键酶;通过MTHFR的作用将 5，10- 亚甲基四氢叶酸 （5，10-MTHF） 转化为 5- 甲基四氢叶酸 （5-MTHF），形成可以为甲基形成甲硫氨酸过程中重要的 HCY ;作用机制是与维生素12维持甲硫氨酸合成酶 （MTR） 的活性，催化 HCY 合成甲硫氨酸。同时MTHFR可以影响机体的DNA、RNA转录，蛋白质等物质的合成提供甲基。

对于MTHFR酶活性及稳定性，MTHFR基因位点的稳定性非常重要，一旦MTHFR基因位点变异，则影响MTHFR酶活性、稳定性。其作用会导致 5-MTHF生产减少，继而影响机体的 DNA、蛋白质甲基化反应异常，HCY 向甲硫氨酸转化受到影响。MTRR基因位点变异，会影响MTRR酶的活性，MTRR酶活性降低会影响HCY 向甲硫氨酸转化。THFR和MTRR基因多态性均可造成高 HCY 血症，直接或间接导致不良妊娠的发生。相关研究表明，其二者的与唐氏综合征、先天性心脏病、等早期多种不良妊娠有密切的联系。本次研究结果显示，两组MTHFR C677T 位点基因比较，c66c，C677T 基因型比较差异有统计学，P<0.05。T677T基因型比较无统计学意义，P>0.05。两组MTRR A66G位点基因分型比较，A66A，A66G基因型比较有统计学意义，P<0.05。G66G基因型比较无统计学意义，P>0.05。两组MTHFR A1298C位点基因分型比较无统计学意义，P>0.05。提示，不良妊娠结局与MTHFR  C677T、 MTRR A66G位点的基因多态性分布有关系;相关研究也表明， C677C 酶活性正常，C677T 酶活性较低，故携带 C677T基因与不良妊娠结局有关系。

综上所述，MTHFR  C677T、 MTRR A66G位点的基因多态性分布与不良妊娠的发生有相关性，MTHFR  C677TT 和 MTRR  66 AG 是不良妊娠发生的独立危险因素。现在社区已经将叶酸在妊娠早期进行免费发放，可以加强相关的健康教育，提高孕妇对叶酸补充的认知，从而达到降低出生缺陷的发生，提高人口素质。

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作者简介：陈潇菲，硕士研究生，主管技师，研究方向：分子学诊断

通讯作者：葛鑫，本科，主管技师，研究方向：微生物

德州市妇幼保健院 山东德州 253077