梁利 邓炎春 杨卅 刁青云 侯春生

（1 中国农业科学院蜜蜂研究所，北京 100193；2 农业农村部授粉昆虫生物学重点实验室，北京 100193；3 中国农业科学院研究生院，北京 100081）

蜜蜂（Apis mellifera）与其他社会性昆虫一样，缺少像脊椎动物那样的适应性免疫反应，但它们拥有一个高效的先天免疫系统，由体液和细胞免疫协同抵御外源微生物[1-4]。酚氧化酶原（PPO）是一种参与昆虫先天免疫反应的免疫蛋白，丝氨酸蛋白酶级联反应可以水解PPO保守序列的第51个精氨酸生成酚氧化酶（PO）[5]。实际上，PPO不仅存在于血淋巴中，也存在于角质层中[6,7]。通常PPO通过血细胞释放到血淋巴并被激活产生PO，会在伤口部位诱导产生大量黑色素，以防止血淋巴流失和微生物入侵[8-10]。PO催化酪氨酸生成3,4-二羟基苯丙氨（DOPA），并且酚类物质氧化生成醌类物质也是黑色素形成所必须的。虽然阐明PO在昆虫体内的生理生化和分子机制，有助于对其活性进行深入理解，但是纯化过程中PPO活性的不稳定性和快速失活，进而研究者更多关注PPO[11]。迄今为止，已从鳞翅目、双翅目和膜翅目等昆虫中鉴定并纯化了PPO[8,12,13]。其中，Zufelato等从蜜蜂蛹血淋巴中纯化出分子量为70kDa的PO，得到PO的最适pH为6.5，最适温度为20℃[13]。随后克隆了意大利蜜蜂的AmPPO，发现AmPPO在成虫和蛹中的转录水平高于幼虫和预蛹[14]。但AmPPO在不同组织中的详细分布及影响PO活性的因素有待进一步研究，特别是PO在体外的活性及其影响因素未见报道。

本研究利用半定量PCR 技术检测了AmPPO 在工蜂和蜂王不同组织中的分布，发现AmPPO 在工蜂和蜂王不同组织中均有分布。……