刘佳霖 李亚迎 罗文华 曹兰 高丽娇 刘怀

（1 重庆市畜牧科学院，荣昌 402460；2 西南大学植物保护学院，重庆 400715）

蜜蜂成年工蜂的微量注射技术已广泛应用于蜜蜂的生物学研究。在蜜蜂的RNA 干扰试验中，利用微量注射技术将目的基因的dsRNA 注入工蜂体内，可干扰目的基因的表达，进而评价目的基因的功能[1]。例如，中华蜜蜂（Apis cerana cerana）工蜂微量注射0.5μLCYP301A1、CYP303A1和CYP306A1的dsRNA能够显著降低虫体对应目的基因的相对表达量，而下调的这3 个P450（Cytochrome P450 monooxygenases）基因能够显著提高工蜂饲喂敌敌畏、噻虫嗪、百草枯和溴氰菊酯后的死亡率，表明P450 家族基因参与了中华蜜蜂对多种农药的解毒代谢[2]。此外，通过微量注射dsRNA 干扰卵黄原蛋白vitellogenin 基因的表达能够显著增加西方蜜蜂（Apis mellifera）的嗅觉敏感性[3]，干扰IRS（Insulin receptor substrate）基因的表达能够改变工蜂的采集行为[4]。这些研究表明，基于成年工蜂微量注射的RNA 干扰技术对研究蜜蜂基因的功能具有十分重要的作用。与此同时，工蜂的微量注射还应用于评价不同物质及病原微生物对蜜蜂的影响，如微量注射章鱼胺和酪胺能够显著影响蜜蜂的运动行为[5]。注射接种蜜蜂残翅病毒能够显著降低工蜂的寿命，下调卵黄原蛋白vitellogenin基因的相对表达量；同时暴露于DWV 和噻虫嗪的工蜂表现出更低的寿命，并导致工蜂提前开始采集行为[6]。注射接种蜜蜂以色列急性麻痹病毒能够改变采集蜂的嗅觉敏感性，降低采集结束后的回巢成功率[7]。

尽管蜜蜂成年工蜂的微量注射技术已广泛地应用于蜜蜂的生物学研究，但不同注射条件是否能够显著影响工蜂注射后的生存仍没有相关报道。……