益母草碱预处理对大鼠缺氧/复氧心肌细胞存活能力及TLR4/NF-κB通路蛋白表达的影响
2021-09-08胡志良丁水印
胡志良,池 豪,丁水印
1)驻马店市中心医院心血管内科 河南驻马店 463000 2)郑州市中心医院心血管内科 郑州 450000
心肌梗死(myocardial infarction,MI)是最常见的心血管疾病之一,具有较高的死亡率。通过直接经皮冠状动脉介入治疗进行早期再灌注仍然是MI最有效的治疗方法[1]。然而,再灌注缺血心肌可诱发继发性损伤,即心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤,心肌I/R损伤可导致心肌细胞肥大、心肌纤维化,最终导致心肌细胞死亡。心肌I/R损伤的减轻或消除仍然是MI治疗的重要研究课题。益母草碱(leonurine)是药用植物益母草的主要活性成分,具有活血调经、减轻水肿、抗肿瘤等作用[2-3]。近期有研究[4]证实,益母草碱对缺血心肌具有保护作用。益母草碱能够通过抑制p38MAPK/MEF2信号通路抑制异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌重构[5]。本实验通过缺氧/复氧诱导心肌细胞I/R损伤,探究益母草碱预处理对缺氧/复氧心肌细胞损伤的影响及可能的作用机制,以期为心肌I/R损伤的防治提供新的策略。
1 材料与方法
1.1 材料大鼠心肌细胞H9c2由美国ATCC提供。益母草碱(纯度>97%)由上海思域化工科技有限公司提供。DMEM高糖培养基由美国Life Technologies公司提供;胰蛋白酶、胎牛血清由美国Sigma公司提供;青链霉素双抗由美国Hyclone公司提供; CCK-8试剂盒由南京碧云天生物技术有限公司提供;AnnexinⅤ-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒由日本TaKaRa公司提供;肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6 ELISA检测试剂盒由武汉博士德生物有限公司提供;Cleaved Caspase-3、Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、抑制蛋白IκBα抗体及辣根过氧化物酶标记的二抗由美国Abcam公司提供;S……
