郭萍，陈建，王化强，葛凯杰

0 引言

2018年全球范围内新增胃癌患者100余万例，死亡约78万例，胃癌已为常见的高致死率的癌症之一[1]。手术是胃癌的主要治疗方法，但大多数患者在确诊时已处于晚期，失去了手术机会。而接受化疗的晚期患者，客观缓解率仅为20%～40%，中位总生存期为6～11月，另外化疗引起的不良反应也不容忽视[2]。目前对肿瘤的治疗以晚期癌症的分子靶向治疗研究为热点，分子靶向抑制剂可有效调节与肿瘤发生密切相关的信号途径，从而调节肿瘤细胞的生物学行为[3]。蛋白质精氨酸甲基转移酶5（PRMT5）是Ⅱ型精氨酸甲基转移酶，可催化精氨酸残基处底物蛋白质的对称二甲基化。最近研究显示，PRMT5通过阻断不同的信号通路转导影响蛋白和基因表达的修饰、细胞周期进程、细胞代谢和侵袭等过程[4]。另外PRMT5在调节癌细胞的生长和转化中也起着关键作用，有研究显示下调PRMT5的表达，可通过PI3K/Akt信号通路抑制癌细胞增殖和细胞周期转变[5]。本研究通过检测PRMT5在胃癌细胞中的表达水平，利用转染技术敲低PRMT5的表达水平后，进一步分析PRMT5对胃癌细胞生物学活性的影响及可能的作用机制，为胃癌的靶向治疗提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

胃癌细胞系MGC803、SGC7901、MKN45和人胃黏膜上皮细胞GES-1购于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）、RPMI 1640培养基、MTT粉末、结晶紫粉末购于北京索莱宝有限公司；BCA蛋白定量试剂盒、凋亡检测试剂盒购于江苏碧云天技术有限公司。阴性对照质粒：上游引物序列5'-GTCAGTGCATGCTGGTGAC-3'，下游引物序列5'-CCGTGTAGGTTCGCGTGA-3'；……