孔佑虔 宋爱英 王小玉 唐寅★

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）为我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，尽管近年来影像技术、外科手术、放疗、化疗等医学手段快速发展，但大部分患者就诊时仍处于肺癌晚期，故早期诊断NSCLC 病情进展、及时采取治疗措施是提高该病诊疗率的关键［1］。核苷酸切除修复交叉互补组1（excision repair cross -complementation group l，ERCC I）基因在多种肿瘤细胞均呈高表达状态，对肿瘤DNA 的合成、再生起到重要作用［2］。报道发现P21 活化激酶（p21-activated kinase，PAK）与肿瘤的发生、发展、转移等有关［3］。组蛋白去乙酰化酶1（histone deacetylase1，HDAC1）可抑制肿瘤细胞的增殖，诱导肿瘤细胞凋亡、产生细胞毒性［4］。本研究将分析免疫组化检测ERCC1、PAK 及HDAC1 蛋白的表达及临床意义。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2015年1月至2017年6月收治的62例NSCLC 患者。分型：鳞癌27 例，腺癌21 例，腺鳞癌14 例。男36 例，女26 例，平均年龄（51.31±6.65）岁。纳入标准：①所有患者符合NSCLC 规范化的诊断［5］；②术前未接受辅助治疗；③无其它恶性疾病；排除标准：①合并肝、肾、心脏脏器严重疾病者；②合并严重神经功能、认知功能障碍者；③依从性差者。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，受试者均签署知情同意书。

1.2 样本采集及ERCC1、PAK 及HDAC1 蛋白表达水平检测

将术中切取的癌组织作为癌组织组，将癌旁正常组织（距离肿瘤5 cm）作为癌旁正常组织组。检测ERCC1、PAK 及HDAC1 蛋白［6］：SP 法，石蜡切片标本厚2 μm，烘烤60℃，二甲苯脱蜡，浸泡3次。3 次离子水中浸泡抗原修复切片，磷酸盐缓冲液（PBST）洗3 次。内源性过氧化物酶阻断剂滴加，室温孵育15 min，冲洗。一抗（GPCR124 多克隆抗体浓度1∶100）滴加，室温孵育1 h，冲洗。辣根酶标羊抗小鼠/兔IgG 聚合物滴加，室温孵育30 min。……