娄红刚 张琛涵 康富贵 聂静云 柴琛

据统计，我国新发胃癌病例占全球范围内所有胃癌的44.10%左右［1］。DNA 拓扑异构酶I（Topoisomerase I，TopoI）在胃癌肿瘤细胞DNA 复制、转录中具有关键作用，抑制其活性是选择性抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡的重要靶点［2］。目前，羟基喜树碱（Hydroxycamptothecin，HCPT）是唯一上市的以TopoI 为靶点的抗肿瘤药物，在多种肿瘤治疗中取得一定疗效，但临床实践发现此类化合物存在药物代谢效力低下、稳定性差异等局限性［3］。故亟需开发以TopoI 为靶点的非喜树碱类药物。木脂素属于天然化合物，结构类型丰富，具有包含抗炎、抗病毒、抗肿瘤在内的广泛生物活性［4］。本研究通过体外实验探讨Mzs-1 诱导SGC-7901 细胞凋亡、靶向抑制TopoI 的机制，为临床开发、应用Mzs-1 作为治疗胃癌候选药物提供实验依据。报告如下。

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

Mzs-1 有青岛科技大学夏亚穆教授合成提供，人胃癌细胞株SGC-7901 购于上海生命科学研究院，由兰州大学第一临床医学院中心实验室冻存，DEME 培养基（高糖）购于Gibco 公司，PBS 购于Hyclone 公司，胎牛血清（FBS）购于浙江天杭生物科技股份有限公司，0.25%胰蛋白酶（含0.02%EDTA）购于北京索莱宝科技有限公司，双抗（青/链霉素100×）、50×TAE 缓冲液、Meilunred 核酸电泳染料、羟基喜树碱（HCPT）购于大连美仑生物技术有限公司，DMSO 购于Sigma 公司，CCK-8 购于上海翊圣生物科技有限公司，PBR322 质粒、DNA Topo I、DNA marker、6× Loading buffer 购于TaKaRa 公司，琼脂糖购于HydraGene 公司，Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒、BCA 蛋白定量试剂盒、PMSF 蛋白酶抑制剂购于上海碧云天生物技术有限公司，SDSPAGE 凝胶制备试剂盒、5×电泳缓冲液、10×转膜缓冲液、10× TBST、RIPA 裂解液、5×蛋白上样缓冲……