张志敏，刘鑫艳，张永梅，潘志兰，周 洁，林凤茹

独立生长因子1B(growth factor-independent 1B， GFI1B)是一种核转录抑制因子，位于人类基因组9q34.13[1]。GFI1B基因主要表达于胎儿、成人的红系和巨核系，是两系生成和分化过程中一种必需的转录因子，故其表达水平的高低与急性白血病、T细胞淋巴瘤、重型再生障碍性贫血等血液系统疾病密切相关[2]。急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia, AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病，以骨髓和外周血中原始和幼稚髓细胞异常增生为特征[3]。目前有关GFI1B基因在AML中的表达规律及其与患者临床特征之间的关系报道较少[4]，本研究通过分析AML患者GFI1B表达及与其病情、预后的关系，以期研究GFI1B的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1临床资料 回顾性分析2018年5月—2020年3月本院收治的AML患者的临床资料。纳入标准：均由临床、血常规、骨髓象确诊为AML[5]；病例资料完整；年龄<80岁。排除标准：合并其他血液系统疾病者；合并心、肝、肾等器官和系统严重疾病或恶性肿瘤者；妊娠期和哺乳期女性、精神障碍者。根据纳入排除标准最终纳入106例AML为观察组，男61例，女45例；年龄26～78(43.52±5.73)岁；AML类型：M1型28例、M2型22例、M5型21例、M4型20例、M6型10例，M7型5例；另选取同期在本院进行体检的健康者100例为对照组，男性51例，女性49例；年龄27～77(43.54±5.78)岁。2组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1检测仪器及试剂：以实时荧光定量PCR仪(PQ-PCR)及超敏CRP检测仪(PQ-CRP)检测GFI1B mRNA的表达并进行动态观察，荧光分析仪(ABI-5700)购自美国PE公司，PQ-PCR引物合成、荧光探针合成、PQ-PCR用dNTP、5×PQ-PCRbuffer购自广东达安临床检验中心，PCR引物合成购自北京赛百盛公司。

1.2.2检测方法：①细胞分离、总RNA提取：抽取2组新鲜外周血4 ml，肝素(107 U/L)抗凝，加Ficoll淋巴细胞分离液4 ml，离心(2000 r/min)20 min分离出单个核细胞，0.9%氯化钠注射液洗涤3次。采用异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法提取细胞总RNA，1 g/L琼脂糖凝胶电泳，紫外投射仪显示28 S和18 S两条清晰的条带，显示提取完整的RNA。②cDNA的合成：逆转录体系20 μl，包括细胞总RNA 1 μg，随机引物500 ng，RNA酶抑制剂25 U，5×逆转录反应缓冲液4 μl，MMLV逆转录酶200 U。37℃、60 min，94℃、5 min，1℃、2 min终止反应。……