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聚合酶螺旋反应检测肺炎克雷伯菌与临床样本评价

2021-09-02王泉马瑞瑛杨婷张亚丽许苗撒玉玲陈清波

生物化工 2021年4期
关键词:检测

王泉,马瑞瑛,杨婷,张亚丽,许苗,撒玉玲,陈清波

(新疆医科大学第八附属医院检验科,新疆乌鲁木齐 830049)

肺炎克雷伯菌是一种常见的院内感染致病菌,可引起较严重的下呼吸道感染甚至死亡[1-2],在婴儿、肿瘤患者等长期使用抗生素的病人或免疫力较差的老年人中发病率较高。临床症状与其他院内感染细菌无明显差异,难以实现通过临床症状对该菌的精准判断[3],目前临床上针对肺炎克雷伯氏菌的检测方法主要是以传统的培养法结合生理生化鉴定或使用最新的全自动细菌鉴定仪,一般需要2 ~3 d,耗时较长。其操作的便捷性、时效性及灵敏度无法满足临床上快速精准诊断的要求[4-5],因此需要建立一种快速灵敏的检测方法来实现对该菌的鉴定。

近年来,一系列分子生物学技术也被用来进行肺炎克雷伯菌的检测,如聚合酶链式反应(PCR)、多重PCR 和实时荧光定量PCR 等技术[6-8]。但此类方法需要专业的技术人员和精密的温控设备,同时PCR技术中使用的Taq 酶活性易受到待检样本中的抑制物影响而降低甚至失活,造成检测结果不准确[9]。近年来发展的恒温扩增技术(如环介导等温扩增技术、聚合酶螺旋反应等)是利用BstDNA 聚合酶的作用实现核酸扩增,受待检样本中抑制物影响较小而在临床微生物检测中广泛应用。

聚合酶螺旋反应(PolymeraseSpiralReaction,PSR)技术因其操作简单,耗时短,具有较高的特异性及灵敏度的优势在病原微生物快速检测方面发展迅速,相关学者已成功将PSR 技术应用于食源性致病菌、痰液样本中结核分枝杆菌等致病菌的检测。……

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