杨国伟，王树翠，杨树林

（山东第一医科大学（山东省医学科学院）公共卫生与健康管理学院，山东泰安 271016）

茯苓为多孔菌科茯苓属真菌，多寄生在松科植物树根上[1]。茯苓中，多糖含量约为80%，其具有降血糖、抗肿瘤、消炎和增强免疫力等药理功效[2]，是发挥免疫作用的主要物质，能够提高非特异性免疫系统功能，增强小鼠的抗原特异性体液免疫反应[3]，显著增强小鼠腹腔内吞噬细胞活性，提高NK 细胞的自然杀伤能力[4]，同时对正常细胞无毒副作用[5]。

本实验采用水提醇沉法对茯苓多糖进行提取[6]，并以茯苓多糖作为免疫调节剂，以4 ～5 周的小鼠为研究对象，以胸腺指数、脾脏指数、胸腺细胞凋亡率为指标，反映茯苓多糖对小鼠免疫系统的影响；并对实验组和对照组小鼠进行粪便细菌的微生物分类测序与分析，以分析茯苓多糖对免疫系统的影响是否与肠道菌群相关。

1 材料与方法

1.1 实验动物与试剂

济南朋悦实验动物繁育有限公司的4 ～5 周SPF 级昆明雌鼠，平均体重为30 g；安徽省亳州市的破壁茯苓粉；分析纯无水乙醇。

1.2 仪器与设备

AP-01P 真空抽滤机，天津奥特赛恩斯仪器有限公司；R E-52A 型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；BKQ-Z30 高压蒸汽灭菌器，济南巴艾贝斯生物工程有限公司；BCD-215WTPM（E）冰箱，合肥美的电冰箱有限公司；BX53F 荧光显微镜，奥林巴斯工业有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 茯苓多糖水溶液的制备

采用水提醇沉法制备茯苓多糖，方法为：称取一定量的茯苓粉末，按照茯苓与水的重量比1 ∶20，85 ℃水浴加热4 h，采用抽滤机和孔径为0.22 μm的滤膜进行过滤，收集到的滤液浓缩至原体积的1/10，醇沉浓度为80%，静置12 h，过滤获得滤饼后，用80%乙醇洗涤干燥后称重；……