韦祥银

（润盈生物工程（上海）有限公司，上海 201700）

克劳氏芽孢杆菌（Bacillus clausii）属于革兰氏阳性细菌，可产生芽孢，属于嗜碱杆状细菌，产过氧化氢酶和氧化酶，可降解明胶和淀粉、还原硝酸盐。克劳氏芽孢杆菌产生的碱性蛋白酶在清洁剂、丝绸脱胶、皮革工业、食品工业、制药行业、摄影行业及生活垃圾处理等领域有重要的应用价值[1-3]。克劳氏芽孢杆菌作为碱性蛋白酶天然分泌的优势菌株之一，有着重要的应用前景及价值[4-5]。

克劳氏芽孢杆菌除了产碱性蛋白酶，还具有益生菌功能，其产生的芽孢具有很强的抗逆性，具有耐酸、耐碱和耐胆盐特性，可顺利通过人体胃、胆汁，到达肠道后萌发，刺激人体免疫反应，可用于治疗儿童和成人腹泻和便秘问题[6-8]。

本文利用单因素试验、正交试验、最陡爬坡试验和响应面法对克劳氏芽孢杆菌BC-G21 的培养工艺和培养条件进行优化研究，得到克劳氏芽孢杆菌BC-G21 的最佳发酵培养基组成和培养条件，为克劳氏芽孢杆菌发酵研究提供一定参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

克劳氏芽孢杆菌BC-G21，润盈生物工程（上海）有限公司研发中心实验室菌种库提供。

芽孢发酵基础培养基：葡萄糖5 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化钠0.5 g/L、磷酸氢二钾0.3 g/L、氯化钙3 g/L、七水硫酸镁0.25 g/L、一水硫酸锰0.05 g/L、pH调至中性。

改良的LB 培养基：蛋白胨10 g/L、氯化钠10 g/L、酵母粉5 g/L、pH 调至9.5。

1.2 仪器和设备

HH-W600 数显恒温三用水箱，常州中捷实验仪器制造有限公司；百伦BLBIO15 型发酵罐，上海百伦生物科技有限公司；SKY-2102C 恒温培养振荡器，上海苏坤实业有限公司；……