赵静雅，夏荟清，彭梦雅，凡卓，殷悦，徐赛博，张楠，陈文波，陈琳琳

假禾谷镰孢转录因子FpAPSES的鉴定与功能分析

赵静雅，夏荟清，彭梦雅，凡卓，殷悦，徐赛博，张楠，陈文波，陈琳琳

河南农业大学植物保护学院/小麦玉米作物学国家重点实验室，郑州 450002

【】假禾谷镰孢（）侵染小麦引起的小麦茎基腐病严重影响中国小麦的安全生产。查找假禾谷镰孢中的APSES转录因子，分析其在病原菌致病过程中的作用，为解析假禾谷镰孢的致病机制及小麦茎基腐病的防治提供理论依据。从GenBank获得物种中已知的APSES氨基酸序列，利用BLASTP方法在假禾谷镰孢中查找APSES同源蛋白，利用pfam软件预测蛋白结构域，采用MEGA5.05构建APSES蛋白的系统进化树。利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法分析A组APSES转录因子基因和在假禾谷镰孢侵染过程中的表达。通过PEG介导的原生质体转化和PCR筛选和基因缺失的突变体菌株。在PDA培养基上测定假禾谷镰孢野生型菌株Wz2-8A、Δ和Δ突变体菌株的菌丝形态和生长速率；测定在CMC培养液中培养后的分生孢子产生情况、形态以及在无菌水中的萌发率；利用菌丝块和分生孢子接种小麦胚芽鞘和大麦叶片以及盆栽试验测定其致病性；采用ELISA方法测定小米培养基中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的含量。假禾谷镰孢中有4个APSES同源蛋白，均含有保守的DNA结合结构域HTH。与其他物种的APSES蛋白构建系统进化树，发现FpAPSES1、FpAPSES2和FpAPSES4属于A组APSES，FpAPSES3分布在C组。和在侵染阶段诱导表达，推测可能参与假禾谷镰孢的致病。分别获得2个和基因缺失的突变体菌株Δ-T10、Δ-T27和Δ-T1、Δ-T2。……