刘洋洋, 周乐豪, 郝梦洋, 蔡海波, 谭文松

(华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237)

1 前 言

免疫细胞疗法已成为治疗恶性肿瘤的新希望[1]，其中NK 细胞作为一种以非主要组织相容性复合体限制(major histocompatibility complex，MHC)方式发挥其杀伤肿瘤细胞的免疫细胞[2]在临床上有重要应用价值。然而，原代NK 细胞难以获取和进行体外扩增限制了其临床应用。随着细胞克隆技术的发展，已建立多种NK 细胞系，包括KHYG-1、NK-92、NKL、NKG 和YT 细胞[3-4]，其中NK-92 细胞是一种依赖白细胞介素-2(IL-2)扩增的细胞，抗肿瘤谱广，表达CD56，不表达CD3，具有强烈的细胞毒性作用[5-6]。NK-92 细胞经过基因改造可得到CAR-NK-92 细胞，在临床上具有极大的应用潜能[7-8]。为满足临床细胞输注的要求，NK-92 细胞的体外高效扩增是其临床应用的重要保证。搅拌式生物反应器因可提供均匀的培养环境是进行悬浮细胞体外规模化扩增的常用装备[9]。然而搅拌式生物反应器在运行过程中会产生流体剪切力，而其剪切力大小会随搅拌桨桨型的差异而变化[10]。有研究表明常用的螺旋搅拌桨运行时产生的流体剪切力较大，会对剪切力敏感的细胞造成伤害；而球体搅拌可显著减小流体剪切力的产生[11-12]，避免因剪切力损伤而导致细胞扩增能力的下降。在搅拌式生物反应器中，磁力搅拌瓶是通过磁场的变化控制搅拌装置运动实现培养体系的混合，其流体剪切力的大小同样受磁性搅拌子形状和性质的影响[13]。为此，研制磁性搅拌珠并通过其有规律的运动，达到混合培养体系的目的，是设计磁性生物反应器的一个新思路。……