基于Wnt/β-catenin信号探讨苗药五藤膏对膝骨关节炎模型兔软骨组织中β-catenin蛋白及MMP-13、c-myc mRNA表达的影响
2021-09-01申海艳周静肖丽娜马武开姚血明陈琳韩珊
申海艳 周静 肖丽娜 马武开 姚血明 陈琳 韩珊
(1贵州省骨科医院骨外科,贵州 贵阳 550001;2贵州中医药大学第二附属医院风湿免疫科;3贵州中医药大学)
膝骨关节炎(KOA)是一种因关节软骨损伤、退变而引发的慢性关节病。其症状表现为膝关节肿胀、僵硬、膝关节酸痛及活动受限。老年女性发病率高,中后期可导致关节畸形、甚至废用,使患者生活质量严重下降〔1〕。目前临床治疗KOA主要以缓解症状为主。苗药五藤膏作为贵州中医药大学第二附属医院长期用于治疗KOA的临床外治经验方,课题组前期临床研究已显示可有效缓解老年KOA患者关节疼痛、僵硬等临床症状,治疗KOA疗效确切〔2~5〕。KOA发病机制复杂,有研究认为被激活的Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)参与了骨关节炎的病理过程,其表达水平在Wnt信号通路中发挥了重要作用,Wnt通路的关键蛋白能够显著降低KOA软骨细胞基质金属蛋白酶(MMP)-13、原癌基因(c-myc)等靶基因的表达量〔6〕。由于β-catenin表达能够使下游Wnt基因MMPs、c-myc等异常表达,因此正常水平的β-catenin对软骨细胞发挥正常功能尤为重要。本研究通过建立KOA模型,从细胞及分子水平探讨不同剂量苗药五藤膏干预相应的时间对KOA模型家兔关节软骨β-catenin蛋白及MMP-13、c-myc表达的影响。
1 材料与方法
1.1实验动物 2019年3~6月选取同一批4~5月龄健康家兔96只,体重1.5~2.5 kg,由贵州中医药大学中心实验室提供,遵照实验动物伦理要求。饲养于贵州中医药大学动物实验中心,室温20~25℃,湿度50%~60%,实验动物合格证号:SCXK(黔)2018-0012。
1.2实验药物 苗药五藤膏(黑骨藤30 g、大血藤30 g、小花青风藤30 g、香血藤30 g和络石藤30 g打成细粉与凡士林按1∶1的比例混合制成),本实验药物为贵州中医药大学第二附属医院院内制剂(黔药制字Z20120072),由贵州中医药大学第二附属医院制剂室提供。……
