曹鋐 崔颖

锦州医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科

扫描电镜能够将耳蜗的表面的结构放大几千至上万倍，并且其具有景深长，离体感强等特点。因此能够根据样本表面的三维结构对样本进行综合分析。但是由于其镜筒内部是高真空的环境，水分在真空环境下挥发由于表面张力的缘故，会引起样本收缩，破坏样本微细结构，因此样本在进行观察之前要将样本进行脱水干燥处理[1]。

由于耳蜗样本中含有大量的水分，其无法与液态的CO2进行置换，因此要将耳蜗中的水分置换成能够与液态CO2互溶的中间液体。醋酸异戊酯由于其与液态二氧化碳良好的相溶性，被广泛的作为临界点干燥法的中间液使用[2-4]。但其操作繁琐，易挥发，对眼及上呼吸道粘膜有刺激性。为提高实验效率，简化实验流程，减少醋酸异戊酯因挥发对空气环境的污染，保护了实验人员的安全，本文拟在常规豚鼠耳蜗扫描电镜样本制备方法的基础上进探索新的中间液，并且利用扫描电镜进行观察对比两种中间液的置换效果，旨在建立一种安全、有效、无污染的样本制备方法，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

实验动物：豚鼠6只，体重200-250g，2月龄，雌雄不限，购自维通利华动物饲养中心。耳廓反射良好。实验豚鼠左耳为醋酸异戊酯组（对照组，con‐trol group），右耳为无水乙醇组（实验组，experi‐mental group）。

实验试剂：1%戊巴比妥钠溶液，2.5%戊二醛溶液，0.1M PB溶液，1%四氧化锇溶液，10%EDTA溶液，50%酒精溶液，75%酒精溶液，90%酒精溶液，无水乙醇，醋酸异戊酯，银导电胶。……