葛虎 余艳 周梅华 杨瑶 汪静 张家美 何媛 龚强

长沙金域医学检验实验室(长沙410000)

听力障碍是人类中最常见的神经感觉障碍疾病，在新生儿中发生率为1‰～ 3‰，其中由遗传性因素导致的比例约占60%，包括综合征和非综合征形式，具有高度的遗传异质性[1-3]。目前，与耳聋相关的致病基因已超过300种被报道[4]，分为常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传、X染色体隐性遗传和母系遗传四种遗传方式[3]。针对备孕妇女进行高携带率基因突变位点筛查可有效降低新生儿耳聋发生率。本研究针对湖南地区4132例备孕妇女血液样本，18个耳聋致病基因的108个位点进行筛查，统计分析耳聋相关致病基因的突变位点、突变类型及突变频率等特点，为湖南地区进行耳聋致病基因突变位点筛查提供有效依据。

1 对象与方法

1.1 对象

2018年12月至2019年11月，长沙金域医学检验所有限公司检测的来源于湖南省各地备孕女性(18-40岁)的4132例血液样本。本研究获得长沙金域伦理委员会批准，进行基因检测前，筛查者均被详细讲解耳聋基因筛查的相关知识。

1.2 研究方法

1.2.1 试剂与仪器

核酸提取或纯化试剂盒、遗传性耳聋基因检测试剂盒和测序反应通用试剂盒(芯片)(博奥木华基因)，无核酸酶水和NaOH(Sigma)，异丙醇和无水乙醇(分析纯、湖南汇虹试剂有限公司)，Qubit®dsDNA HS Assay Kit(invitrogen)。生物安全柜(BioBase)，荧光定量仪(Qubit®3.0 Fluorometer)，恒温混匀仪(Themo‐mixer c)，移液枪和高速离心机(Eppendorf)，PCR 仪(ABI Veriti)，基因分析仪(BES4000基因分析仪)。

1.2.2 DNA提取

参照核酸提取或纯化试剂盒说明书提取样本DNA，保存于-20℃冰箱中备用。……