解明华 ， 鲁富有 ， 张容萍 ， 张 潇 ， 张海楠

(1.云南省普洱市宁洱县动物疫病预防控制中心 ， 云南 宁洱 665199 ； 2.云南省普洱市动物疫病预防控制中心 ， 云南 普洱 665100)

2019年7月，在非洲猪瘟防控期间，笔者偶遇某镇护林员巡山发现的2头死亡野猪。经现场剖检、采样和调查，后将病料送普洱市动物疫病预防控制中心兽医实验室检测非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒，结果显示，非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒均为阴性，猪瘟病毒为阳性，确诊野猪因感染猪瘟野毒引起急性死亡。

1 地理环境调查

该村仅有5个村民小组，面积27 km2，有农户81户共303人，人口密度为11.22人/km2。海拔1 540 m，年平均气温 19 ℃，年降水量1 550 mm。地广人稀，森林覆盖率达85.86%。

2 家猪环境调查

2.1 家猪饲养情况调查 全村81户农户中有62户农户饲养家猪，生猪存栏412头。建立有病死畜禽挖坑深埋和办事购买本村畜禽产品的村规民约，近期该村无生猪异常死亡情况。

2.2 家猪免疫背景调查 家猪每年春、秋两季实行重大动物疫病集中强制免疫，生猪应免密度达到100%，群体免疫密度达到90%以上；免疫抗体水平监测均达到70%以上。

3 野猪发病情况调查

3.1 野猪活动调查 野猪死亡地点10 km范围为无人居住的深山密林区，山果丰富，估计野猪数量超过30头，在深山树林间常能看到野猪窝。

3.2 野猪死亡情况调查 护林员陈述，当天下午发现第1头死亡野猪，在返程途中又发现第2头死亡野猪，相距约1 km，大小基本一致，判断属同一活动区域的同窝野猪。

3.3 放山饲养家猪情况调查 距离野猪死亡地点约1 km处有常年放山饲养的家猪17头，其中较小的2头时常跑出猪舍到山中觅食。据畜主陈述，该群家猪健康，无异常情况，已实施免疫，处于免疫保护期。

4 剖检病变

4.1 外观检查 现场检查死于野猪窝中的死猪，体重约35 kg，雄性，营养中下，毛色棕黑。猪尸僵硬，腹围轻度肿胀，有少许尸臭味，苍蝇卵遍布猪尸天然孔及猪体表，但无蛆(中插彩版图1)，推算死亡时间在12 h左右。

图1 野猪死于山林间

4.2 剖检病变 死猪全身各组织无黄染；全身淋巴结轻度肿胀、出血；喉头及气管有少量白色泡沫，会厌软骨等轻度充血；左肺高度肿胀、出血、实变，右肺轻度肿胀、有散在胰肉样病变灶和出血斑；心包液增多，内混有血液，心外膜及心内膜有大面积出血点、出血斑，心冠脂肪部有连片大量出血带，冠状动脉充血怒张(中插彩版图2)，心腔内充满大量凝固血液；肝脏表面粗糙，中度肿胀，与胸膈膜接触部色变深变黑，出血明显，胆汁浓稠量少；与肝脏相近的大肠和空肠浆膜有明显红色出血斑(中插彩版图3)；脾脏不肿大，色变黑变深，有出血小点；肾脏土灰色，有细小出血点；膀胱、直肠色白，无可见病变；回盲口附近有多量散在的红色充血点、充血斑，有少量米粒大溃疡斑点(中插彩版图4)；各胃区颜色分界明显，有多处黑色溃疡斑。

图2 心脏外膜出血、血管充血

图3 肠浆膜出血

图4 回盲口附近有充血斑和溃疡斑点

4.3 病料采取 采取心包液、心腔血于真空抗疑管中，采取淋巴结、肺脏、脾脏、肾脏各约20 g于5号自封袋，标注，保存于有冰袋的冷藏箱中。

5 实验室PCR检测

病料送普洱市动物疫病预防控制中心兽医实验室，取脾脏、淋巴结组织混合进行非洲猪瘟病毒(ASFV)PCR检测、猪瘟病毒(CSFV)巢式PCR检测和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-PCR检测。电泳结果观察及判定显示，非洲猪瘟阴性(图5A)，猪繁殖与呼吸综合征阴性(图5B)，猪瘟阳性(图5C)。

图5 野猪病料PCR检测A: 非洲猪瘟阴性; B:猪繁殖与呼吸综合征阴性; C:猪瘟阳性M: 2 000 bp marker; +:阳性对照(省级中心实验室提供); S: 检测样品，阴性对照设于整块板中，本图未剪取

6 诊断结果

6.1 根据流行病学调查，在同一区域发现2头野猪死亡，且实施过强制免疫的家猪健康，表明野猪感染野毒株，病程为急性，不排除强毒株的可能。

6.2 剖检发现，回盲口附近有充血斑点且有小溃疡病变，但无明显的解剖症状，验证病程为急性，感染发病时间不长并引起急性死亡。

6.3 经实验室PCR检测非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒，确诊野猪因感染猪瘟野毒引起急性死亡；拟送云南省动物疫控中心进行基因测序确诊是否为强毒株。

6.4 对死亡野猪在剖检地挖坑深埋，剖检区域撒布大量消特灵(二氯异氰脲酸钠粉)；对村民饲养家猪实施猪瘟紧急免疫；加强联防联控，群防群控，农业部门负责防控和监测家猪，林业部门负责监控野猪；加强疫情排查和疫情报告。