林家锋，陶晓莉，陆恒章，于美玲，李婷婷，李藤菲，程美慧，李永刚

轮状病毒(Rotavirus, RV)是能够使人类和动物引起一系列消化系统症状的常见病毒，可侵及小肠黏膜并且附着定居，给宿主细胞造成极大的危害[1]。与其他RNA病毒相比，它参与编码6种结构蛋白(VP1、VP2、VP3、VP4、VP6、VP7)及6种非结构蛋白(NSP1、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5、NSP6)，对病毒的增殖及致病有着重要的生物学意义[2-4]。RV大多通过粪-口途径传播，秋冬季节活跃，在一般环境中能稳定生存。它在世界范围内广泛存在，分型众多，A～C组能够导致人类和动物腹泻，D～G组只能导致动物腹泻，给当地家畜业及卫生健康构成极大的威胁[5-6]。一经感染，便可诱发蛋花汤样便、眩晕、发热等具体表现，严重者会因机体内环境失衡而脱水、休克死亡[7]。然而，目前尚无治疗该病毒公认有效的药品或疫苗，此外该病毒与宿主间的互作机制和致病机理还有待进一步研究。

作为一种重要的非结构蛋白，NSP5具有高度磷酸化的功能，能在细胞质内表达且稳定调控病毒的复制和感染周期。研究表明，具有多个骨架蛋白修饰位点的NSP5可与NSP2、VP2以及VP6蛋白共同构成病毒质体，而病毒质体又是病毒复制的主要场所[8-10]。一些学者通过小干扰RNA7(MicroRNA-7)靶向下调NSP5的表达，从而影响病毒质体的形成并抑制RV复制[11]。由此可见，NSP5在病毒的增殖表达及生物学活性中发挥着重要的作用，但具体机制还不清楚，本研究利用分子克隆的方法构建A组RV-NSP5重组表达载体来检测其在细胞内的表达，并对原核表达的条件进行优化分析，确定融合蛋白的富集位置，从而进一步探究分离株RV NSP5在病毒增殖中所承担的作用，同时为后续多抗及相关制剂的制备提供实验基础。……