马春丽，王 利，王羚鸿，董 超，潘海婷，包玉龙

（内蒙古医科大学基础医学院，内蒙古 呼和浩特 010110）

对乙酰氨基酚（acetaminophen，APAP）是广泛使用的非处方镇痛药和退热药的常见成分［1］。 尽管APAP 给药剂量（4 g/d）对健康成人是安全的，但当剂量超过10～12 g/d 时，APAP 可能导致急性肝衰竭（acute liver failure，ALF）［2］。APAP 过量是导致ALF 的主要原因， 在美国占所有ALF 的46%，在欧洲占40%～70%［3］。此外，慢性肝病患者或儿童对APAP 治疗剂量的反应可发展为一系列临床相关肝病， 使得有意或无意的APAP 过量成为西方国家药物诱导肝损伤（DILI）最常见的原因［4］。近年来，对乙酰氨基酚肝毒性的分子机制得到了广泛研究，但对APAP 诱导的ALF 的具体分子机制尚不清楚［5-6］。 该研究建立了APAP 诱导的急性肝损伤小鼠模型， 并对损伤后第2 天的损伤肝脏组织转录组进行RNA-seq， 试图探究在急性肝损伤发生发展过程中相关基因和信号通路。

1 材料与方法

1.1 实验动物

雄性C57BL/6J 小鼠6 只， 随机分为2 组，每组3 只，分别为正常小鼠组（对照）、APAP 急性肝损伤小鼠损伤后第2 天模型组。 实验用小鼠购于北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.2 试验材料

APAP（Sigma，美国），Trizol RNA 提取试剂盒（Invitrogen，美国），NEBNextUltraTMRNA 文库制备试剂盒（BioLabs，英国），UltraPure 琼脂糖（Invitrogen，美国）等。

1.3 试验方法

1.3.1 动物模型建立 选择6 周龄雄性C57BL/6J野生型小鼠经过1 周适应环境的饲养， 模型组腹膜内注射200 mg/kg APAP 溶液，建立急性肝损伤模型。 建模后第2 天，对小鼠进行异氟烷麻醉，解剖肝脏。 解剖前，小鼠停止进食12 h，自由饮水。

1.3.2 组织RNA 提取 小鼠肝脏组织在液氮中研碎。 按照TRIzol RNA 提取试剂盒说明书，提取RNA，-20 ℃冰箱保存备用。为监测RNA 降解和污染，进行1%琼脂糖凝胶电泳。……