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抑制miR-128-3p表达对油酸致大鼠肺损伤的保护作用研究

2021-08-31龙光文杨秀林吉春玲董裕康

安徽医科大学学报 2021年9期
关键词:意义差异水平

龙光文,张 谦,杨秀林,吉春玲,董裕康

急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是一种非心源性因素诱发的急性肺水肿,是以严重低氧血症、呼吸窘迫、肺顺应性下降为主要临床特征的肺部急性炎症性综合征。MicroRNA(miRNA)是一类长度为20~25个核苷酸的非编码RNA分子,主要参与调控细胞增殖、迁移及凋亡等过程。近些年的研究显示,miRNA可以作为ARDS诊断的生物标志物或治疗靶点。且Huang et al研究发现,miR-128-3p在ARDS大鼠模型肺组织中高表达。提示,miR-128-3p在ARDS疾病发生过程中可能起重要作用,但其作用机制还有待进一步探讨。该研究拟通过尾静脉注射油酸的方法建立肺损伤大鼠模型,探讨miR-128-3p在肺损伤大鼠肺组织中的表达变化及下调miR-128-3p表达对模型大鼠肺组织的保护作用及可能作用机制,以期从基因层面为ARDS治疗提供理论依据及新的小分子靶点。

1 材料与方法

1.1 材料

SPF级雄性SD大鼠100只,鼠龄6~7周,体质量(220±10)g,由贵州医科大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证:SCXK(黔)2018-0001。油酸购自湖南长沙恒昌化工有限公司;miR-128-3p拮抗剂(antagomir)及其阴性对照(antagomir NC)购自广州锐博生物科技有限公司;Nrf2抑制剂ML385购自美国Selleck公司;丙二醛(malonaldehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所;组织活性氧(reactive oxide species,ROS)检测试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司;逆转录试剂盒和荧光定量PCR试剂盒购自日本TaKaRa公司;肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司;E2相关因子2(E2 related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和磷酸甘油醛脱氢酶(reduced glyceraldehyde-phosphate dehydrogenase,GAPDH)抗体购于武汉三鹰生物技术有限公司。……
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