田小曼， 李朝红

(1.杨凌职业技术学院，陕西 杨凌 712100； 2.汉中职业技术学院，陕西 汉中 723002)

0 引言

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试药剂 0.3%四霉素AS(辽宁微科生物工程有限公司)，80%乙蒜素EC(武汉三农科技开发有限公司)，72%农用链霉素WP(成都普惠生物工程有限公司)，46.1%可杀得叁千WG(美国杜邦公司)，80%多菌灵WP(陕西美邦农药有限公司)，75%百菌清WP(陕西恒田化工有限公司)，喜嘉旺人工树皮(陕西喜嘉旺生物科技有限责任公司)，极能植皮专家(陕西塞恩农业科技股份有限公司)。

1.1.2 接种材料 番茄植株：将毛粉802的番茄种子用0.5% NaClO表面消毒后投入55℃的水中进行温汤浸种，播种于经过处理的苗床土壤(自然土和基质土以1∶1的比例混匀，并灭菌)中，番茄苗2叶时移栽，每盆1株，45～50 d后接种处理。胡萝卜片：将新鲜胡萝卜切成厚度为1cm的圆片待用。

1.1.3 培养基 MW培养基：甘露醇10 g、0.1%生物素0.1 mL、KH2PO40.3 g、Fe-EDTA 2 mL、NaNO35 g、0.1%结晶紫2 mL、NaCl 0.2g、MgSO4·7H2O 0.1g，加水至1 000 mL。LB培养基：胰蛋白胨10 g、酵母抽提物5 g、NaCl 10 g，加水至1 000 mL。牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏0.5 g、蛋白胨1 g、NaCl 0.5 g、琼脂 2 g，pH 7.0～7.2，加水至100 mL。3种培养基分别按要求制备及灭菌。

1.1.4 试剂盒 蛋白酶K、DNA提取试剂盒(EasyPure Bacteria Genomic DNA Kit)、胶回收试剂盒、2×Taq PCR MasterMix及2×Mix(Promegar)，均购自武汉昆泰锐公司。

1.2 方法

1.2.1 病情调查 于2014年11月和2015年7月对西安市灞桥区狄寨村不同种植年限的樱桃园(每个种植年限随即挑取3个果园)进行樱桃根癌病抽样调查，每个樱桃园随机调查50株樱桃树。查看树势、观察树干、枝条是否有癌肿、虫伤及流胶情况，对树势衰弱的植株进行刨根调查，观察根部有无肿瘤、肿瘤数量、大小情况。根据调查结果计算发病率和病情指数。

病情分级：根据樱桃树的树势和枝条、根部瘤肿情况，采用4级分级标准[4]。……