高录贵，陈朝喜

（1．淮安生物工程高等职业学校，江苏 淮安 223200；2．西南民族大学畜牧兽医学院，四川 成都 610041）

牦牛是青藏高原及其周边地区最重要的草食家畜，能够适应海拔3 000 m以上的极寒气候，为藏区同胞提供奶、肉等生活资料[1-2]。阿坝和甘孜藏族自治州位于川西北藏族聚居区。该地区生存着的大量牦牛，为牧民提供的牛奶及其奶制品。牦牛奶丰富的营养和独特风味备受牧民喜爱[3]。Bandyopadhyay等[4]报道，牦牛是产志贺氏毒素大肠杆菌的天然宿主，且肠道致病性大肠杆菌在牦牛奶及其奶制品中也检测到。然而，国内关于牦牛源大肠杆菌的报道相对较少。本研究主要对采自川西北高原牦牛粪便源大肠杆菌进行耐药性、生物被膜表型和Ⅰ类整合子的检测，以期为后续检测牦牛源大肠杆菌多重耐药性提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

412株大肠杆菌从川西北高原的阿坝和甘孜藏族自治州的牦牛繁育基地和成都青白江区牦牛屠宰场的健康牦牛粪便样本分离。大肠杆菌标准株ATCC25922由西南民族大学兽医药理学实验室保存。

1.2 抗菌药物

14种抗菌药物恩诺沙星、阿米卡星、庆大霉素、多西环素、氟苯尼考、安普霉素、阿莫西林、卡那霉素、利福平、左旋氧氟沙星、磺胺嘧啶、头孢噻肟、头孢曲松和头孢噻呋，均购自上海源叶生物科技有限公司。

1.3 分子生物学试剂

普通PCR分子生物学试剂购自宝生物工程（大连）有限公司。

1.4 试验方法

1.4.1 最小抑菌浓度（MIC）的测定

试验分析参考NCCLS推荐的微量肉汤稀释法，对412株大肠杆菌进行14种抗菌药物最小抑菌浓度测定，试验结果利用WHONET 5.6软件统计分析。……