武梓萌 罗毅沣 张剑锋

(广西医科大学第二附属医院急诊科，南宁市 530007，电子邮箱：18245280117@126.com)

研究表明，百草枯可促进炎症反应的发生，诱导细胞凋亡[1]。百草枯进入机体后会迅速分布在许多重要器官中，其中肺脏是主要靶器官之一，中毒患者早期即可出现急性肺损伤(acute lung injury，ALI)[2]，其主要病理机制可能是肺组织炎症和(或)细胞凋亡[3]，但具体分子机制尚未阐明。本研究拟建立百草枯中毒肺损伤大鼠模型，检测其损伤肺组织细胞凋亡情况，另采用PCR芯片检测凋亡基因，以了解百草枯中毒导致大鼠肺损伤的可能机制，为临床防治提供思路。

1 材料和方法

1.1 实验动物 健康且无特定病原体级SD雌性大鼠18只，购自广西医科大学实验动物中心(许可证号：SCXK桂2020-0003)。鼠龄6～8周，体质量为(200±20)g，洁净空调房间内喂养，实验室温度为(23±3)℃，湿度为(55.5±10.0)%。大鼠分笼饲养(6只/笼)，给予颗粒饲料喂养，自由饮水。

1.2 实验主要药品及试剂 二氯百草枯(Sigma-Aldrich公司，批号： 856177-1G)，TUNEL试剂盒(罗氏公司，批号：11684817910)，4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole，DAPI)染色液(博士德生物工程有限公司，批号：AR1177)，总RNA 提取试剂RNAiso Plus(TaKaRa公司，批号：9109)，反转录试剂PrimeScriptTMRT Master Mix(TaKaRa公司，批号：RR036A)，TB GreenTMPremix Ex TaqTMⅡ(TaKaRa公司，批号：RR820A)，2×RealStar Green Fast Mixture(with ROX Ⅱ)(GenStar公司，批号：A304-10)。

1.3 建模及分组 将18只SD大鼠按随机数字表法分为百草枯组和阴性对照组，各9只。百草枯组SD大鼠给予单剂量的二氯百草枯(20 mg/kg )腹腔注射；阴性对照组SD大鼠给予和百草枯组等量的生理盐水腹腔注射。在腹腔注射后24 h，用10%水合氯醛(0.03 mL/kg)进行腹腔注射麻醉后，将大鼠固定于大鼠固定板上，剪开胸腔，暴露心肺及大血管，结扎大血管后使用0.9%氯化钠冲洗肺血管中残留的血液。……