凌 佳， 柳 卓， 刘 检， 朱 青， 韩远山， 赵洪庆， 孟 盼， 杨 蕙， 王宇红△

(1.湖南中医药大学科技创新中心， 长沙 410208；2.湖南省中医研究院附属医院， 长沙 410006；3.湖南中医药大学第一附属医院， 长沙 410007；4.中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院， 长沙 410007)

糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)是糖尿病患者常见的以认知功能障碍为主要特征表现的慢性并发症。据报道，60%～75%糖尿病患者有抑郁情绪[1]，且DD患者的死亡率明显高于单纯糖尿病患者[2]，因此开展DD的发病机制及防治应用研究很有意义。神经血管单元(neurovascular unit，NVU)主要包含微血管、周围星形胶质细胞及其突起的周围神经元等部分[3-4]。前期研究发现，DD大鼠血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)相关蛋白表达下降，提示BBB损伤[5]，在此基础上推测NVU结构也可能受损。胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)、间隙连接蛋白-43(connexin-43, CX43)和紧密连接蛋白(occluding)分别是星形胶质细胞的骨架蛋白，星形胶质细胞与神经元之间、星形胶质细胞与微血管内皮细胞之间的连接通道。故本研究建立神经元(neuron,NE)、星形胶质细胞(Astroglia，AS)、脑微血管内皮细胞(The brain microvascular endothelial cells,BMECs)三细胞体外共培养体系，采用高糖联合皮质酮模拟DD环境，拟从NVU角度探讨左归降糖解郁方对模拟DD环境下GFAP、CX43及occluding的影响，并初步探讨中药复方对DD大鼠海马NVU的保护作用。

1 材料

1.1 药物

左归降糖解郁方(以下简称左归方)组成：黄芪、牛膝、山茱萸、枸杞子、丹参、熟地黄、菟丝子、姜黄、杜仲、牡丹皮、贯叶金丝桃，购自湖南中医药大学第一附属医院，并按比例水煎浓缩后制成口服液。盐酸二甲双胍片(吉林省东北亚药业股份有限公司，国药准字H22020508，0.25 g/片)；……