赵霞 杨倩 刘志何 高燕 肖淑欣（青岛大学附属医院血液内科，青岛266000）

原发免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia，ITP）是临床最常见的自身免疫性出血性疾病［1-2］。研究证明，慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病［3-4］。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体，并与不同的趋化因子结合，其中Th1细胞优势性表达CXCR3、CCR5，Th2细胞优势性表达CCR3，从而调控Th1和Th2细胞活化与极化［5］。在CD4+T淋巴细胞表面，以上趋化因子受体可作为区分Th1和Th2细胞的标志物［6］。尽管目前ITP发病机制的研究较多，但多数是基于混合淋巴细胞培养的研究，本 文 旨 在 研 究CCR3、CCR5、CXCR3在ITP患 者CD4+T淋巴细胞表面的表达情况及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 研究对象选取2017年7月至2019年6月我院新诊断ITP患者40例，其中男性18例，女性22例，中位年龄［35（18~60）］岁，中位血小板计数（PLT）为［18（5~29）］×109L-1，诊断标准参考文献［1］。以20名健康志愿者为对照，其中男性8例，女性12例，中位年龄［33（21~48）］岁，中位PLT［180（135~280）］×109L-1。所有研究对象知情同意。

1.1.2 主要试剂与仪器RPMI1640培养液（美国Gibco公司）；Ficoll分离液（天津灏洋化学试剂有限公司）；植物血凝素（PHA，终浓度50 mg/L，Sigma公司）；TRIzol试剂（美国Invitrogen公司）；SYBR Green PCR试剂盒（大连宝生物工程有限公司）；细胞总蛋白抽提试剂盒（DBI-1017，Ⅳ型，美国DBI公司）；Bradford试剂盒（P0006，碧云天）；硝酸纤维素膜（NC膜，武汉博士德公司）；丽春红染色液（武汉博士德公司）；Western blot-抗稀释液（碧云天）；CD4-FITC（Dyclone）；α-Tublin抗体（美国DBI公司）；抗FITC免疫磁珠（Miltenyi Biotec）；磁性细胞分离柱（Milte‑nyi Biotec）；VarioMACS磁性分离器（Miltenyi Bio‑tec）；FACScan流式细胞仪（美国Becton-Diskinson公司）；荧光定量PCR仪（ABI PRISM 7500，美国Ap‑plied Biosytems公司）；多功能凝胶图像成像仪（Al‑pha Innotec公司）。

1.2 方法

1.2.1 临床治疗方案给予40例ITP患者泼尼松治疗，起始剂……