miRNA-337调控JAK2/STAT3通路对人肺腺癌细胞PG49增殖和迁移的影响*
2021-08-20李雅菲董清科汪代杰
李雅菲,张 燕,董清科,汪代杰
(四川省泸州市人民医院肿瘤科,泸州 646000)
肺癌是临床常见的恶性肿瘤,是由吸烟、环境和遗传因素之间相互作用引起的,根据肺癌的组织学类别,其可分为肺腺癌、小细胞肺癌、大细胞肺癌和鳞状细胞肺癌,其中肺腺癌的发病率最高[1-2]。目前临床对肺腺癌的治疗效果不理想,大多数患者确诊时已处于晚期或已发生不同程度的局部浸润或转移,失去手术治疗的机会,而即使采用放疗、化疗等治疗方法,晚期患者生存率仍然较低[3-4]。因此,对肺腺癌发病的分子机制深入研究,寻找新的治疗靶点至关重要。微小RNA(microRNA,miRNA)是内源性小分子非编码RNA,调控靶基因的转录和翻译,在包括肺癌等多种肿瘤细胞中异常表达,参与细胞增殖、迁移等生物学过程[5]。研究发现,miR-337在肺癌组织中低表达,上调miR-337表达水平可显著抑制肺癌的发生[6],但其具体机制尚未完全清楚。因此,本研究旨在观察miR-337对PG49人肺腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞和主要试剂 人正常肺上皮细胞BEAS-2B(货号H084)购自上海舜冉生物科技有限公司;人肺腺癌PG49 细胞(货号Y-02117)购自上海富恒生物科技有限公司。miR-337 mimic 慢病毒(LVmiR-337 mimic)、miR-337 阴性对照(NC)慢病毒空载体(LV-NC)由上海吉凯基因有限公司设计并合成;实时荧光定量PCR(qPCR)引物由上海吉玛生物公司设计合成;PCR试剂盒(货号14966005)购自美国ThermoFisher 公司;反转录试剂盒(货号K1622)购自美国Fermentas 公司;Trizol(货号46301)购自美国Sigma 公司;兔抗人单克隆Ki67 抗体(货号ab92742)、鼠抗人单克隆E-钙粘蛋白(E-cadherin)抗体(货号ab11512)、兔抗人多克隆基质金属蛋白酶9(MMP-9)抗体(货号ab97779)均购自英国Abcam公司;……
