曾爱英 廖星 戴木森

（1 福建医科大学省立临床医学院 福州350001；2 福建省立医院急诊内科 福州350001）

铜绿假单胞菌（Pseudomonas Aeruginosa, Pa）是一种革兰阴性非发酵杆菌，是院内感染最常见的细菌之一，常见于烧伤后的继发感染、尿路感染、血流感染、囊性支气管扩张、二重感染及免疫抑制患者的继发感染，位居临床非发酵菌检出率的首位[1~2]。 随着抗生素的滥用，多重耐药菌株不断出现，而导致耐药产生的一个重要机制就是生物被膜（BF）的形成。研究发现磷霉素（FOS）可破坏形成的BF，与其他抗生素联合使用时对BF 内细菌有协同杀菌作用[3]。本研究探讨FOS 对Pa 的BF 的影响及对美罗培南（MEM）的增效作用，为临床多重耐药Pa 感染的治疗提供参考。 现报道如下：

1 材料与方法

1.1 菌株来源 从临床收集Pa 菌株（编号为12078）及质控菌株ATCC29953 均由福建省立医院微生物检验中心鉴定及提供。

1.2 药物与试剂 FOS 为标准品，购于中国药品生物制品检定所；MEM 标准品，购于中国食品药品检定研究院。

1.3 实验方法

1.3.1 最 低 抑 菌 浓 度 （Minimal Inhibitory Concentration, MIC）的测定 参照美国2014 CLSI 微量肉汤稀释法[4]测定临床分离Pa12078，以肉眼观察无细菌生长的最低药物质量浓度为MIC。ATCC29953 作为质量控制菌株。

1.3.2 BF 的制备 将Pa 复壮于无菌LB 琼脂平板上， 过夜后挑取单个菌落接种于盛有50 ml 胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）的烧瓶中，置于恒温摇床（37℃，180 r/min）过夜，次日用新鲜TSB 过夜培养菌液稀释成 OD600=0.2（菌液浓度约为 5.0×108CFU/L）。 将无菌14 mm 的载体分别放入无菌24 孔板中， 随后每孔加入2 ml 稀释好的菌液， 放入37℃恒温培养箱培养， 隔日更换培养液。 7 d 载体表面形成成熟BF。

1.3.3 结……