路晓琳，张洁雯，秦杰，郝娜，王巍巍，成艳梅

(邯郸市中心医院妇二科，河北 邯郸 056001)

0 引言

上皮性卵巢癌属于较为常见的恶性肿瘤，尽管随着治疗技术的进步，但本病患者预后差，疗效仍然不理想。随着我国对卵巢肿瘤发病机制的不断进展[1]，不少学者发现本病高发期在患者绝经后的10～20年内，体内促性腺激素水平呈上升趋势[2]。也有研究发现FSH对卵巢肿瘤细胞株SKOV-3、3AO增殖具有一定的促进作用，基于此本研究旨在探究FSH对上皮性卵巢癌细胞株SKOV-3、3AO增殖的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 SKOV-3、3AO细胞株

院内妇科实验室、试验中心本研究提供研究样本，分别为SKOV-3、3AO细胞株，上述细胞样本均使用培养基(RPMI-1640)加以培养。

1.1.2 药品

选择重组人卵泡刺激素(静脉注射，美国)。

1.2 方法

SKOV-3、3AO从液氮中取出后，将其放入温水中，温水温度为37℃，摇晃至完全融化，基于无菌操作下，离心，将冻存液去掉(1000转/min)，PBS液洗涤一次，离心去PBS，加入含胎牛素 (10%)、青霉素100U/mL、链霉素100μg/mL的RPMI-1640培养基1mL悬浮细胞，将细胞置入培养瓶。补充培养液，直至5mL，细胞培养放置于培养箱中(温度37℃)，5%的二氧化碳。或进行进一步的传代培养，吸出培养液，在SKOV-3、3AO细胞长满至80%融合后，选取PBS液冲洗，冲洗次数2次，在培养瓶内加入胰蛋白酶-EDTA消化液(浓度0.25%，剂量2mL)，轻轻摇晃，在倒置显微镜下观察，待细胞变成圆形，细胞连接减少后将消化液去掉，加入培养基(2mL)，以停止消化。并轻轻反复吸吹液体冲打瓶壁，使细胞脱落，加入培养液悬浮细胞并分别转入2个培养瓶中，补给培养液，继续培养。SKOV-3、3AO细胞接种于放有盖玻片的培养皿中培养，待细胞贴壁生长至对数生长期，换用分别含有不同浓度FSH和LY294002的新鲜培养基，定时镜下观察并照相。……