姜 涛， 欧阳文献， 谭艳芳， 唐 莲， 张 慧， 李双杰

湖南省儿童医院 肝病中心， 长沙 410007

先天性胆汁酸合成障碍2型(congenital bile acid synthesis disorder type 2，CBAS2)是醛酮还原酶家族1D1(Aldo-ketoreductase family1 member D1，AKR1D1)基因突变引起△4-3-氧固醇-5β-还原酶缺乏所致的胆汁酸合成障碍性疾病，其主要临床表现为新生儿胆汁淤积症和暴发型肝衰竭[1]。自1988年Setchell等[2]根据血尿FAB-MS分析首次诊断2例△4-3-氧固醇-5β-还原酶缺陷患儿后，有关CBAS2的病例报道仅数十例[3-4]。现对收治的CBAS2患儿临床特征、转归以及AKR1D1基因变异进行了分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 收集2017年1月—2020年11月本院肝病中心诊治的4例CBAS2患儿病例资料，其中男2例，女2例。

1.2 基因检测及分析 在父母签署知情同意书后，抽取患儿和父母外周静脉血2 ml，提取合格的人类基因组DNA进行文库制备。文库制备是将基因组DNA打断成主带<500 bp，峰值在350 bp的小片段DNA，将打断后的DNA片段进行末端补平，在3′端加“A”碱基，使得DNA片段能与5′端带有“T”碱基的特殊接头连接，经Pre-Capture LM-PCR对带有接头的文库进行扩增。等量混合文库后，加入人类外显子文库进行杂交，捕获Exon capture区域，再通过PCR扩增富集捕获后产物。琼脂糖凝胶电泳测定文库的片段大小，Qubit3.0及荧光定量PCR测定文库的浓度。将质检合格的文库稀释至上机浓度，使用IlluminaHiseq测序平台进行测序分析，测序结果通过生物信息学方法进行数据分析，后由遗传咨询师进行报告解读。

检索内部数据库、dbSNP、ESP6500、ExAC等人群数据库，标注单核苷酸多态性和低频良性变异。对患儿父母及主要亲属相应突变外显子进行PCR测序，以明确突变来源。应用预测软件对变异的保守性/致病性/危害性进行预测。检索HGMD、PubMed、Clinvar、OMIM等数据库中的变异相关文献，分析文献内容，参考美国医学遗传学和基因组学学会变异分类指南，对变异进行分类。

1.3 伦理学审查 本研究方案经由湖南省儿童医院伦理委员会审批，批号：KY2020-06。

2 结果

2.1 临床特点和预后 4例CBAS2患儿均以皮肤黄染为首发表现，确诊年龄为3～5月龄，病例2父母为近亲结婚。所有患儿均有肝大、浅黄色大便表现，病例1伴有生长发育迟缓和脾大，实验室检查提示：胆汁淤积，转氨酶升高，凝血全套、Alb和TBA正常(表1)，2例患儿伴有脂溶性维生素(A、D、E)缺乏，腹部彩超提示肝大、小胆囊和肝实质弥漫性病变。……