曾裕文， 张芳雍， 谭国钳,2， 吴 帆,2

1 暨南大学附属广州红十字会医院 肝胆外科， 广州 510220； 2 广州市红十字会医院 肝胆外科， 广州 510220

原发性肝癌的发病率持续增长，已居恶性肿瘤死亡率的第四位[1]，尽管目前肝癌治疗水平已有较大提高[2]，但其预后依然不容乐观[3]。探索肝癌侵袭转移的分子机制及寻找有效的肝癌治疗靶点仍是肝癌研究的重要内容。已有研究[4-5]表明，中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1，NCEH1)在侵袭性前列腺癌细胞中高表达，抑制NCEH1的表达则可降低前列腺癌细胞的增殖、转移和侵袭能力，提示NCEH1是一促癌基因。然而截至目前，NCEH1在肝癌中的表达及作用均尚不清楚。本研究旨在了解NCEH1在肝癌组织及细胞系中的表达情况并探讨其对肝癌细胞增殖、凋亡、转移及侵袭能力的影响。

1 材料与方法

1.1 NCEH1基因样本 选取2013年1月—2019年6月在暨南大学附属广州红十字会医院手术治疗的32例肝癌患者标本及对应的癌旁组织。所有标本离体后立即存放在液氮罐中，然后于-80 ℃深低温箱中保存。采用实时荧光定量PCR检测NCEH1基因的相对表达量。同时从ICGC数据库(https://daco.icgc.org)下载截至2020年9月日本人群的肝癌基因表达数据(包含240个肝癌样本和220个正常肝组织样本)作为验证组，应用R软件(4.0.2版本)中的limma、beeswarm包对NCEH1基因表达数据进行Wilcoxon秩和检验并做散点差异图进行可视化[6]。

1.2 细胞培养 HL7702正常人肝脏细胞系和SMMC-7721、Bel-7402、HepG2和Hep3B人肝癌细胞系均购自中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，293T细胞购自上海吉凯基因化学技术有限公司，细胞置于37 ℃、5% CO2细胞培养箱中，以含10%胎牛血清(FBS)的高糖DMEM培养基培养，按常规进行传代。……