施凯舜 徐 峥 陈 岩 黄 洁

（浙江中医药大学附属第二医院老年科，浙江 杭州 310005）

非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver，NAFL）是一种与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝病，大约15%的NAFL患者会进展为相关的肝纤维化[1]，有效控制NAFL的发生发展对延缓疾病进程至关重要。研究发现，当归芍药散加减治疗NAFL疗效显著，故进一步研究当归芍药散对NAFL的药理机制对于指导临床、优化制剂有较大意义。

双特异性磷酸酶（dual specificity phosphatase-9，Dusp9）是近十年发现的一类酪氨酸特异性的磷酸酶。最新研究发现，Dusp9可通过抑制肝细胞凋亡信号调节激酶1（apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK1）活性，调控p38丝裂酶原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK）和c-jun氨基末端激酶（JNK）的磷酸化而显著改善非酒精性脂肪性肝炎（NASH）[2]。我们运用转录组芯片分析技术，对高脂高糖饮食诱导的NAFL小鼠进行了肝组织转录组表达谱分析，发现当归芍药散组Dusp9基因mRNA表达量较模型组显著升高，是模型组的数倍。故本研究基于Dusp9介导探讨当归芍药散对NAFL模型小鼠肝脏ASK1-JNKp38信号通路的影响，现报告如下。

1 实验材料

1.1 动物 C57BL/6雄性小鼠，体质量16～20 g，SPF级，购于中国科学院上海实验动物中心。动物生产许可证号：SCXK2018（沪）-0062。动物使用许可证号：SYXK（沪）2018-0167。所有动物均饲养于中国科学院上海实验动物中心SPF级动物房，温度20～26 ℃，相对湿度40%～70%，光照循环条件是12 h明12 h暗。饲料采用实验室等级颗粒料，鼠采食量一般为5～6 g/d，通过水瓶自由饮水，饮水量一般为8～10 mL/d。

1.2 药物与试剂 当归芍药散药液制备：取当归9 g、芍药20 g、茯苓12 g、白术12 g、泽泻20 g、川芎12 g（药材购于上海雷允上药业有限公司），参照授权专利ZL200610009140.0制备工艺制备成浓度分别为1.29、2.58及5.16 g/mL的低、中、高剂量药液，冰箱冷藏备用。……