李应鹤，初晓红，宋扬，徐刚，李贽，于镭

（哈药集团生物疫苗有限公司，哈尔滨150069）

猪细小病毒病是由猪细小病毒（PPV）引起的一种猪繁殖障碍病，主要表现为胚胎和胎儿的感染和死亡，特别是初产母猪产死胎、畸形胎和木乃伊胎，但母猪本身无明显的症状[1]。猪细小病毒病目前尚无有效治疗方法，主要采取预防措施，因此猪细小病毒病疫苗的生产工艺研究尤为重要[2]。本研究分别使用MontanideTMISA 206 VG佐剂（简称206佐剂）和白油佐剂进行猪细小病毒病灭活疫苗的配制，首先比较白油佐剂和206佐剂之间乳化工艺差异，再通过疫苗的物理性状检测、安全性检验和效力检验，分析两种佐剂对疫苗免疫效果的影响[3]。

1 材料

1.1 制苗用病毒液

浓缩后的猪细小病毒L株灭活病毒液（浓缩前病毒液红细胞凝集价为1∶512），由哈药集团生物疫苗有限公司制备和提供。

1.2 主要试剂

MontanideTMISA 206 VG佐剂（206佐剂），购自法国赛比克公司；2-溴乙胺氢溴酸盐（BEA），购自Sigma公司；Span-80和Tween-80，购自广州西陇化工有限公司；硬脂酸铝，购自天津市致远化学试剂有限公司。

1.3 红细胞凝集抑制抗原

猪细小病毒L株，批号为PPV-HI Ag-201401，红细胞凝集价为1∶512，规格为1.0 mL·瓶-1，均由哈药集团生物疫苗有限公司制备或提供。

1.4 血清

猪细小病毒阳性血清，批号为PPV-Pos-Serum-201401，HI效价为1∶512，规格为1.0 mL·支-1；猪细小病毒阴性血清，批号为PPV-Neg-Serum-201401，规格为1.0 mL·支-1，均由哈药集团生物疫苗有限公司制备或保存。

1.5 红细胞悬液

0.5%豚鼠红细胞悬液按现行《中国兽药典》进行制备。

1.6 试验动物

2～4日龄乳鼠，由哈药集团生物疫苗有限公司实验动物中心提供；……