陈振华，杨茂红

（1.重庆大学附属三峡医院设备保障部；2.重庆三峡医药高等专科学校附属人民医院检验科，重庆 404000）

TEK-II 全自动血细胞分析仪采用电阻抗计数法，检测结果包括21 项血液参数及3 个直方图，具有检测速度快捷，结果准确且重复性好等优点。本文主要围绕TEK-II 全自动血细胞分析仪的检测原理、工作时序，对使用过程中出现的典型故障进行分析、排除介绍。

1 检测原理

电阻抗法细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质，以对等渗电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行计数和体积测定。原理如图1所示，电极间的电阻遵守Ohms 定律：V=R·I=P(L/a)（V:电极两端的电压；I：电流；R：宝石微孔电阻；P：电解质阻抗；L:宝石微孔长度；a:宝石微孔横截面积）当细胞快速流经宝石微孔时，由于细胞是不良导体，宝石微孔电阻R 加大，相当于宝石微孔的横截面积a 减小，在电流恒定的情况下，出现瞬间的电压变化而产生一个电脉冲，电脉冲的数量就是流经宝石微孔的细胞数；电脉冲的大小与细胞大小成正比，从而能计数细胞并测定细胞大小。

图1 电阻抗法血细胞计数原理

2 液路工作时序分析

2.1 第一次吸样

吸样注射器（M4）下行，吸样针从样品管中吸取20ul全血。

2.2 吸样针外壁清洗

吸样针上行时，排液泵工作通过8 号阀抽吸稀释液清洗针外壁，同时M6 开启屏蔽盖。

2.3 第一次稀释

吸样针转至白细胞计数池，池内液体同时排空，然后样针下行至池底部喷出样本，同时M7 注射器上移打入4ml 稀释液混匀，形成白细胞计数细胞液。

2.4 第二次吸样

吸样注射器（M4）下行，样针下行至白细胞计数池中部，吸取32ul 白细胞计数细胞液。

2.5 第二次稀释

吸样针上行转至红细胞计数池，喷入吸取的白细胞计数液。M5 注射器上移喷入5ml 的稀释液，混合形成红细胞的计数细胞液，同时溶血剂注射器(M4)上行向白细胞计数池打入1ml 溶血剂至白细胞计数液充分混匀。

2.6 计数和比色

M6 将屏蔽盖合上，接着计数注射器(M3）缓缓下行，仪器开始计数，计数液定量为270ul 左右，计数完成后仪器对白细胞混合液进行比色。

2.7 白细胞计数池的第一次清洗

屏蔽盖打开，白细胞计数池内液体排空，吸样针转至该池内由M7 上行喷入5ml 的稀释液进行清洗。

2.8 红细胞计数池的清洗

吸样针转至红细胞计数池由M5 上行喷入5ml 稀释液进行清洗。

2.9 白细胞计数池的第二次清洗

吸样针再次转至白细胞计数池，由M7 上行喷入5ml 的稀释液进行清洗，过后又喷入5ml 稀释液待机浸泡。

2.10 回到准备状态

吸样针归位，屏蔽盖合上，计数结果显示,仪器进入准备做样状态。

3 故障现象及维修

（1）开机自检结束后，WBC、RBC 及PLT 本底报告提示超标。①试剂中的杂质和气泡。试剂中的杂质或气泡经过计数孔时，会引起计数电压的变化，杂质或气泡越大，电压越大，本底越高。对于不合格及有杂质的试剂必须立即更换，更换后需要多执行“更换试剂引导”程序，排除管路系统中的气泡。②外界对试剂中电离子的数量与溶度的影响。温度越高，试剂中电离出的导电离子越多，溶度高，其导电性能越好，液体通过计数孔的电压越稳定。反之，温度越低，电离出的离子少，结晶多，导电性能低，液体通过计数孔的电压变化大，本底高。该设备的工作温度范围为10～35℃，将环境温度提升至15℃，本底归零。外界中的电场或磁场会使试剂中的离子偏移，导致液体中的正负偏向。计数时，正离子会使电平拉高，负离子会使电平拉低，因为电平的变化，从而产生本底。所以仪器应远离离心机、变压器等高频设备。③电极线生锈或接触不良。电极线生锈或接触不良，导致电极两端电阻增大，电极线两端的电压也随着增大，当试剂通过计数孔时，产生电压的变化也变大，从而产生本底，更换新电极即可解决。④计数注射器M3 漏气、电磁阀EV5 及EV7 性能不良。计数注射器M3 及电磁阀EV5、EV7 漏气导致通过计数孔的流速减慢，通过计数孔的电离子数量减少，电阻变大，加载在两端的电压变大，从而产生本底，更换M3 计数注射器破损的密封圈即可。EV5、EV7 电磁阀性能不良，开合不彻底，排液不畅通，导致试剂从计数池溢出也会产生本底。如果清洗电池阀的阀芯后故障依旧，必须立即更换。⑤计数孔的孔径变化（俗称“堵孔”）导致。稀释液中的杂质经过宝石孔时会引起计数孔电压的变化，电压的变化随着计数孔直径的大小改变。当宝石孔的孔径变小时，其电压变大，产生本底。在长期使用过程中，蛋白质粘附计数孔导致孔径变小或微堵时有发生。可以选择仪器的“清洗”功能进行正反冲清洗。或者进入“诊断”菜单，手动打开EV5、EV7 两个电磁阀及废液泵，排尽两个计数池中的稀释液，用注射器加入酶清洗液进行浸泡。对于顽固性堵孔，可以拆下计数杯底座连接M3计数注射器的硅胶管，连接50ml 注射器手工正反冲计数孔，即可解决。

（2）空白测试为0，RBC 及PLT 计数正常，WBC 和HGB显示为“****”。①溶血素没加入导致。该仪器WBC 和HGB的共用一个计数池检测。工作时序第5 步第二次稀释结束后，EV6 电池阀打开，溶血剂注射器M4 上行向WBC 计数池注入1ml 溶血剂。溶血素快速溶解RGB 释放出HGB，释放出的HGB与溶血素中的活性剂结合形成复合物进行比色，遵循朗伯—比尔定律。同时使WBC 形成规律性的变化，细胞内物质渗透出细胞膜，形成“膜胞核”。当溶血剂加入不充分时，RBC破裂不完全导致WBC 假性升高HGB 异常。此故障可以手工加入1ml 溶血剂进一步确定。沿着管路依次检查溶血剂喷嘴、M4 注射器、EV4 电池阀，发现M4 注射器漏液，更换M4 注射器活塞密封圈后恢复正常。②WBC 计数池脏导致。高铁血红蛋白衍生物覆着在WBC 计数池，影响了WBC 通道的计数。用厂家提供的探头清洗液对杯壁进行清洗，故障解除。

4 结语

全自动血细胞分析仪是一种精密的医学检验仪器，在各级医院中广泛使用，其故障大多分为液路故障和气路故障两大部分，电路故障的概率相对较小。同时，参数设置的增益范围和人员操作的的不规范将会造成不同的故障现象。WBC分类不准确，RGB 和PLT 计数互相干扰，直方图异常等故障时有发生。医学工程技术人员只有熟练掌握血细胞分析仪的检测原理与基本结构，联合临床检验医师共同分析探索，并不断提升业务水平。