许君艳，庄路阳，王 丹，杨 敏

郑州安图生物工程股份有限公司，河南郑州 450000

嗜铬细胞瘤和副神经节瘤(PPGLs)是罕见的内分泌肿瘤，分别在肾上腺和神经节出现。PPGLs最常见的临床表现是高血压，多数患者表现为难治性高血压，伴随有头痛、心悸、多汗、头晕、恶心、胸闷、腹痛等症状[1-4]。随着研究者和临床专家们对PPGLs发病机制和相关标志物的认识不断深入，以及检测技术的不断发展，检测血浆或尿液中的甲氧基肾上腺素(MN)和甲氧基去甲肾上腺素(NMN)被认为是目前辅助诊断PPGLs的最有效手段[5-7]。

由于我国对MN、NMN的检测以质谱技术为主，缺乏化学发光免疫分析法检测产品，本研究依据国内首次公开的技术与资料[8-9]，建立针对MN和NMN的化学发光免疫检测技术。该技术具有快速、经济、自动化程度高、检测准确等优点，便于临床的推广和使用，更好地辅助PPGLs的临床诊断。

1 材料与方法

1.1材料 MN与NMN纯品购自TRC公司，结构类似物纯品购自阿拉丁；MN的特异性多克隆抗体与NMN的特异性多克隆抗体均购自郑州伊美诺生物技术有限公司，辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(SA-HRP)购自上海生工公司。表面包裹有羧基功能基团的磁微粒购自德国Merk公司。生物素酰氨基己酰-6-氨基己酸N-羟基琥珀酰亚胺酯购自百灵威科技公司。

1.2试剂的配制 (1)检测试剂稀释液的配制：配制Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L，pH7.4)，加入0.5%(m/v)的牛血清清蛋白，0.1%(m/v)的Proclin 300。(2)磁微粒包被：按照磁珠供应商提供的操作指南将MN抗体或NMN抗体包被于磁微粒表面，抗体/磁微粒的比例为25 μg/mg。包被完成的磁微粒储存于上述检测试剂稀释液中，磁微粒终水平为1 mg/mL；……