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亚低温培养对猪肝细胞形态与功能的影响

2021-08-13张世昌顾春荣刘京萍

胃肠病学和肝病学杂志 2021年7期
关键词:实验

黄 蕾,张世昌,2,顾春荣,刘京萍,陈 黎

1.南京医科大学第一附属医院检验学部,江苏 南京 210029; 2.第三军医大学西南医院传染科;3.南京医科大学第一附属医院产科

随着生物人工肝的快速发展,肝细胞需求量的增加,同时生物人工肝治疗肝功能衰竭需要迅速提供大量高活性的肝细胞,有效地保存和运输肝细胞是其解决方法之一[1]。当前常用超低温冻存和4 ℃保存肝细胞的方法,在复温后肝细胞活力和功能均有较大程度的降低,复温时需要繁琐的步骤和严格的实验条件,也不方便肝细胞的长距离运输[2-4]。故亟需为生物人工肝细胞材料——肝细胞的保存和运输探索一种更方便有效的方法,以进一步促进生物人工肝的临床应用。

肝细胞的保存和运输是生物人工肝临床应用的重要条件之一,也是解决肝细胞材料短缺的有效方法之一。传统的细胞保存方法主要采用超低温-80 ℃、-196 ℃长期保存或在0~4 ℃短期保存[5-8]。在超低温长期冻存肝细胞的降温和复温过程中,通过-5~0 ℃时细胞内水分结冰导致冰晶损伤。温度下降时,细胞外的水分先结冰,未结冰溶液的电解质浓度升高,使细胞膜受损并发生渗漏,复温时即可因大量水分渗入而死亡[9]。虽然加入冻存保护剂和加快复温速率可部分减少这些损伤,但复温后的肝细胞活力和功能仍有较大程度的降低,而且在复温时要求复杂的实验步骤和严格的实验条件[10-11]。0~4 ℃短期保存的肝细胞复温后,肝细胞功能和细胞膜亦受到损伤,并诱导细胞凋亡[12]。……

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