桑花叶卷叶病相关病毒外壳蛋白抗体的制备及利用
2021-08-10孔卫青杨金宏
孔卫青,凌 君,杨金宏
(安康学院 陕西省蚕桑重点实验室, 陕西安康 725000)
桑花叶卷叶病相关病毒(Mulberry Mosaic Leaf Roll-associated Virus,MMLRaV)寄生桑树引起的桑花叶卷叶病,又称桑花叶型萎缩病,是桑树的重大病害之一。患病桑树叶脉有瘤状突起,严重枝条停止伸长,叶片皱缩变小,叶缘卷曲,硬化早[1]。该病可以通过线虫、嫁接等多种方式传播[2],在中国蚕桑产区发生普遍,浙江、江苏、陕西、四川、重庆等国内主要蚕桑产区发病率从4.6%到76.9%,造成桑树严重减产,每年春、秋二季损失桑叶约30000t,折合损失蚕茧约2300t。
MMLRaV属于线虫传多面体病毒属(Nepovirus),该属病毒平均直径为27.84nm[3],也有报道为28~30nm[4],在植物体内以双联体病毒粒子存在,部分病毒伴生有卫星RNA[5-7]。MMLRaV基因组由2条单链正义RNA组成,RNA1链有6309个编码碱基,编码2102个氨基酸,携带病毒复制及RNA稳定的关键基因。RNA2链有3279个编码碱基,编码1092个氨基酸,N末端和C末端分别为运动蛋白基因(movement protein,MP)和外壳蛋白(coat protein,CP)基因[4]。其中MP基因控制病毒克服细胞壁的屏障,并从最初感染的细胞向其它部位扩散,即实现细胞间移动(短距离运输)和通过维管束系统的长距离移动[8]。
CP基因编码的病毒外壳蛋白是病毒唯一的结构蛋白,作为一种非细胞生命体,病毒的遗传物质仅仅简单的被CP蛋白包裹,因此,CP基因影响着病毒粒体的形成和稳定性,其蛋白质外壳上的化学基团——抗原决定簇也决定了抗原特异性,影响其线虫传播特性和血清学特性,在病毒的侵染过程中扮演多种角色[8-9]。卢全有等[10]曾利用MMLRaV RNA2链C端CP基因的序列片段进行融合蛋白表达,并制备了多抗血清,但其没有进行进一步应用。……
