王 贺 张婷婷 周 群

牙周炎不仅是导致成年人牙缺失的主要原因，还与糖尿病、心血管疾病、肥胖等密切相关[1]。免疫炎症反应在牙周炎发生和发展过程有着重要作用[2]。微小核糖核酸（micro ribonucleic acid，miRNA）是一种单链、短RNA，具有21～25个核苷酸，参与调节细胞发育、分化、增殖和凋亡。既往研究表明，miRNA在多种炎症反应中均有表达[3]。miRNA-146a是第一个被发现对免疫系统有调节作用的miRNA。已有研究发现，慢性牙周炎唾液中miRNA-146a水平显著升高，且与龈沟炎症程度及牙周损伤程度呈显著正相关[4]。近年研究发现，miRNA-146a可通过负反馈调节NF-κB信号通路减轻或抑制炎症反应[5]，但其在牙周组织中的抗炎机制尚不清楚。脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）是牙周炎发生的主要毒力因子。牙龈成纤维细胞是牙周组织中最丰富的细胞。巨噬细胞为免疫炎症反应中重要成分。本研究以LPS诱导牙龈成纤维细胞和巨噬细胞炎症反应，探讨了miRNA-146a在牙周组织的表达及其抗炎作用机制。

一、资料和方法

1.材料

BABL/c小鼠：北京维通利华实验动物技术有限公司，SPF级，雌性，周龄6～8周，体重20～30g；DEME高糖培养基：上海中乔新舟生物科技有限公司，货号ZQ-108；0.25%胰酶溶液：杭州吉诺生物医药技术有限公司，货号GNM-27260；脂多糖：北京索莱宝生物科技有限公司，货号L8880；miRcute miRNA提取分离试剂盒：北京天根生物科技有限公司，货号DP501；反转录试剂盒：北京百奥莱博科技有限公司，货号ALH266-DWM；SYBR Select Master Mix试剂盒：上海恒斐生物科技有限公司，货号4472908；Lipofectamine 2000：美国赛默飞公司，货号11668019；小鼠肿瘤坏死因子-α检测试剂盒、小鼠白细胞介素-1β检测试剂盒、小鼠单核细胞趋化蛋白-1检测试剂盒：上海晶抗生物工程有限公司；……