李宏军， 施源， 何敏， 李坚， 王君君， 邓新超， 鲁密，张辉， 吴岩， 吴红丽， 梁平

（武汉市第八医院，湖北武汉430010）

膝骨关节炎（knee osteoarthritis）属老年性退行性关节疾病，其病理特征除表现为关节软骨的损伤和损失外，还合并有关节下骨的重塑、骨赘形成、韧带松弛、关节周围肌肉减弱等病变，并在一些病例中存在滑膜炎症[1]。本课题组前期研究表明，千草方熏洗联合关节内注射透明质酸（hyaluronic acid）能够有效缓解膝骨关节炎，降低膝骨关节炎的炎症因子水平，延缓关节软骨的破坏[2-3]，但有关千草方熏洗治疗膝骨关节炎的具体机制尚不明确。因此，本研究构建了膝骨关节炎大鼠模型，观察千草方熏洗对大鼠膝骨关节炎的治疗作用及其机制，现将研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物10周龄SPF级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠32只，体质量（300~350）g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，动物质量合格证号：11401300043471。动物实验方案通过武汉市第八医院动物伦理委员会批准。大鼠饲养于SPF环境中，温度为22~26℃，相对湿度为50%~60%，12 h明暗光源，自由饮水和进食。

1.2 药物、试剂与仪器千草方组成：千年健30 g、鹿衔草30 g、透骨草20 g、伸筋草20 g、防风20 g、木防己20 g、丹参20 g、牛膝20 g。中药材由武汉市中医医院中药房提供。透明质酸钠购自山东正大福瑞达制药有限公司（国药准字H10960136）。米醋（江苏恒顺醋业股份有限公司）；白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）检测试剂盒，Masson染色试剂盒均购自Bio-Swamp（中国）；兔抗Ki67、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）、磷酸化糖原合成酶激酶3β（p-GS3Kβ）、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、β-actin等抗体及小鼠抗糖原合成酶激酶3β（GSK3β）抗体均为英国Abcam公司产品。……