细胞周期蛋白L1对人绒毛膜滋养细胞生物学行为的影响
2021-08-06杨闪闪唐冉冉江华汤秋勤
杨闪闪 唐冉冉 江华 汤秋勤
1南京医科大学(南京210029);2南京医科大学附属妇产医院(南京市妇幼保健院)(南京210004)
胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)指胎儿应有的生长潜力受损,估测的胎儿体质量小于同孕龄第10 百分位数的小于孕龄儿[1]。我国FGR 平均发病率为6.39%[2]。 FGR 会增加胎儿窘迫、早产、死产等多种不良妊娠结局,对子代远期健康也会造成不良影响[3]。FGR 发病机制尚不明确,母亲对胎儿的营养供应主要通过胎盘转运,胎盘发育缺陷或功能障碍往往导致FGR[4]。滋养层细胞是胎盘最主要和最重要的成分,了解滋养层细胞功能的影响因素,从胎盘层面寻找FGR 防治的新分子并深入研究相关机制十分必要。
细胞周期蛋白L1(cyclin L1,CCNL1)定位于3q25.31,是细胞周期蛋白家族成员之一,参与前体mRNA 的剪切及RNA 的加工,并与细胞周期蛋白依赖性激酶的作用相关[5]。多个GWASs 研究在《Nature Genetics》等杂志上报道了CCNL1 为新生儿出生体重相关基因[6-9],位于CCNL1 附近的rs900400 与出生体重降低显著相关,每个风险等位基因可使出生体重降低35 g[8]。本研究通过体外实验将滋养细胞过表达和干扰CCNL1 基因后,观察滋养细胞迁移、侵袭、增殖能力及细胞周期、凋亡的变化,为FGR 发病机制的研究提供新的思路。
1 材料与方法
1.1 主要试剂和细胞人绒毛膜滋养细胞(HTR8⁃/SVneo)为本实验室储存细胞株。CCNL1 过表达慢病毒及其对照慢病毒购自汉恒生物科技有限公司、CCNL1 小干扰RNA 及其小干扰对照RNA 购自锐博生物科技有限公司;转染试剂Lipofectamine 3000 和Trizol 购自美国Invitrogen 公司;逆转录试剂盒、荧光定量PCR 试剂盒和蛋白Marker 购自美国Thermo 公司;……
