阿布都艾尼·热吾提 肖伟 周文正 车立新 徐江波 孙俊刚

骨关节炎(osteoarthritis，OA) 是一种常见的慢性退行性关节疾病，其特征是关节软骨、滑膜与软骨下骨的炎症改变[1-2]。OA 的病因十分复杂，包括关节损伤、遗传、肥胖、衰老和炎症等，其确切的发病机制仍不十分清楚[3]。软骨细胞是关节软骨中的特有细胞，合成由 Ⅱ 型胶原蛋白和蛋白聚糖组成的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)，并且在维持 ECM 代谢和分解之间的动态平衡方面起着关键作用[4]。研究发现，软骨细胞的增殖与凋亡异常均与 OA 发生发展密切相关[5]。微小 RNA(microRNA，miRNA) 是一类小、非编码 RNA 分子，长度约 20～22 个核苷酸，通过与 3’-非翻译区(untranslated region，UTR) 相互作用来调节转录后水平的基因表达[6]。随着越来越多的 miRNA 被发现，其在 OA 中的生物学功能受到极大的关注，并可能成为 OA 新的诊断标志物和分子治疗靶点[7]。miR-145 是当前研究最多的 miRNA 之一，其在生物发育、肿瘤形成及炎症反应中均具有重要作用[8-10]。研究显示，miR-145 对于维持血管平滑肌细胞的分化状态和调节胚胎干细胞的自我更新十分重要[11]。此外，miRNA 表达谱芯片数据表明，miR-145 在 OA 软骨细胞中的表达水平明显下调[12]。目前关于 miR-145 在 OA 中的生物学作用尚不清楚。本研究通过建立不同浓度肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α) 诱导人关节软骨细胞模型，观察 miR-145 对细胞增殖、凋亡及炎症反应的影响，旨在为 OA 防治提供新的方向与思路。

材料与方法

一、方法

1.细胞培养：人关节软骨细胞系(C-20 / A4 和 CH8) 购自中科院上海细胞库。所有细胞均放置于 37 ℃ 含 5% CO2的细胞培养箱(Bio-Rad 公司，美国) 中培养，给予充足……