田 杰，范芝宏, 杨 娟, 蒋雪莹, 杨明东, 郭晓芳

登革热(Dengue fever，DF)是由登革病毒(dengue virus, DENV)引起的急性蚊媒传染病，主要通过埃及伊蚊或白纹伊蚊叮咬传播。DENV有4个血清型(DENV-1、DENV-2、DENV-3、DENV-4)[1]。2019年，WHO将登革热列为“2019年全球十大健康威胁”之一[2]。目前全球有128个国家，约39亿人口处于疾病风险之中，年感染DENV人数3.9亿[3-4]。2015-2018年我国广东、云南、浙江、福建、海南、湖南和山东省累计报告登革热暴发111起，共涉及12 490例病例[5]。云南省位于我国西南部，边境线4 060 km，与常年有登革热流行的缅甸、老挝、越南接壤。仅2009-2014年，从东南亚输入云南的登革热病例为384例[6]。自2013年云南省首次暴发登革热以来，瑞丽市每年均有登革热的暴发流行[7]。而景洪市于2013年、2015年和2017年先后发生了DENV-3、DENV-2和DENV-1的暴发流行[7-9]。2013-2018年，玉溪市除了2016年，每年仅有1～3例输入病例报告，分别来自云南西双版纳州及泰国、老挝、缅甸和马来西亚。为弄清2019年玉溪市输入的登革病毒血清型及病毒来源，本研究对登革热病例样本进行病原检测和分析，为当地登革热防控提供病原学依据。

1 材料与方法

1.1材料 2019年输入玉溪市的登革热疑似病例和临床诊断病例的诊断依据为《登革热诊断》WS 216-2018[10]。采用广州万孚生物技术股份有限公司生产的胶体金法登革病毒NS1抗原检测试剂作为病例临床诊断试剂。血清样本采集后冷藏运输至本实验室-80℃冰箱保存待检。病例个案信息来自国家传染病报告信息管理系统。

1.2方 法

1.2.1DENV RNA提取和血清型分型 吸取200 μL血清样本，用西安天隆公司生产的病毒DNA/RNA提取试剂盒(磁珠法)提取病毒RNA。参考《登革热诊断》WS 216-2018合成DENV1-4型特异引物和探针，用实时荧光RT-PCR进行DENV血清型分型。……