张伟，王世银，高莉，杨力伟，邓双义，刘晓娜，石国庆，甘尚权

巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中miR-486靶基因的研究

张伟1,2，王世银1，高莉1，杨力伟1，邓双义1，刘晓娜1，石国庆2，甘尚权2

1新疆农业职业技术学院，新疆昌吉 831100；2新疆农垦科学院畜牧兽医研究所/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖重点实验室，新疆石河子 832000

【】为了深入挖掘巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中miR-486的靶基因，为最终阐明巴什拜羊优良肉质性状形成的分子调控机制奠定基础，同时为巴什拜羊的持续选育提供理论依据。分别采集了巴什拜羊胎儿期40，50，60，80，100和120 d，以及出生当天，出生后30，60和90 d共计10个不同发育阶段的骨骼肌组织，分别利用胎儿期6个阶段的混合mRNA和出生后4个阶段的混合mRNA构建了胎儿期和出生后骨骼肌中miR-486调控靶基因的cDNA文库，并利用高通量测序技术对cDNA文库中的靶基因信息进行了深入挖掘。在对所得候选靶基因功能分析的基础上，选择10个候选靶基因，使用qRT-PCR检测其在巴什拜羊上述10个不同发育阶段骨骼肌中表达量的变化，结合课题组前期获得的miR-486在巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中的表达规律，对其靶向调控关系及生物学功能进行初步验证和分析。进而选择其中的4个候选靶基因使用荧光素酶报告载体试验和巴什拜羊骨骼肌卫星细胞中的靶向调控试验最终确认其靶向调控关系。通过对两个cDNA文库高通量测序数据的分析，胎儿期和出生后分别获得了123个和118个miR-486的靶基因，因其靶向调控关系未经实验验证，故暂称为候选靶基因。……